化石贝壳中氨基酸对映体的毛细管气相色谱分离.PDFVIP

化石贝壳中氨基酸对映体的毛细管气相色谱分离 刘德明 王金权 （中国科学院南京地质古生物研究所） 近十几年来，对氨基酸D及L对映体的 仪器： （日）岛津GC-5A气相色谱仪， 生物地球化学研究表明，除可以更深入地了 FID，CLH-1毛细管支架，E-1A数据处理 解地球上和宇宙空间中氨基酸的存在、来源 机。 及演化外，还开拓了许多边缘学科的新领 色谱柱：玻璃毛细管SCOT柱，OV-17， 域1，如氨基酸年代学、地层对比及古生物 30m 0.37mm；SP-2250，30m 0.30mm。 化学。 试剂：D/L氨基酸为层析纯；6mol/L盐 氨基酸对映体的拆分，目前采用气相色 酸，用恒沸盐酸重蒸后用；2mol/L氢氧化铵， 谱法较为普遍，而旋光酰化剂N-三氟乙酰- 加热氢氧化铵用重蒸馏水吸收后配制；水为 L-脯氨酰氯═TPC）可以在实验室中合成，将 去离子水重蒸一次；其它有机试剂纯化为无 氨基酸对映体与TPC反应，制备成氨基酸二 水级。 肽甲酯衍生物进行色谱分析。过去常用填充 二（）设备及合成 柱分析，以致某些氨基酸对映体分离受到一 1.TPC及氨基酸非对映衍生物的合 定限制2,3本文采用30mSCOT柱，对化 成及反应路线如下 石中氨基酸对映体拆分获得较满意结果。 酸化甲醇 室温搅拌下滴加5ml乙酰 氯于100ml无水甲醇内。 实 验 部 分 2.N-三氟乙酰-L-脯氨酰氯TPC）合 一（）仪器与试剂 成4〔5〕 ml无水苯混合液于产物 （I）内，通入纯氮 1.151gL-脯氨酸置于干燥称重的烧瓶 2.5小时，减压除溶剂，用二氯甲烷洗涤两 内，加20ml无水乙醚，于-15℃缓慢滴加 次。最后用二氯甲烷配制成0.1mol/LTPC 10ml三氟乙酸酐，加毕即撤去冰盐浴，待混 溶液 （）。 合物回升到室温后，在磁搅拌下通入纯氮1 3.N-三氟乙酰-L-脯氨基氨基酸甲酯 小时，减压除去溶剂得产物 （I）。 合成 室温下搅拌，滴加8ml氯化亚砜与12 约10mg氨基酸总量加1ml酸化甲醇， 振荡后置于90℃油浴内，直到溶液至干， 困难，目前尚未见到用普通液相拆分上述对 待反应物冷至室温，加1mlTPC，振荡后 映体的报道。Abe6〕曾用光学活性固定相拆 加数滴三乙胺，使pH值在10左右。1小时 分过这六个对映体，但在拆分较不易挥发氨 后加1ml6mol/L盐酸，经离心取有机层， 基酸对映体时，则没有或未完全分离D/L天 用无水硫酸镁干燥，吸取清液干氮气流下至 冬氨酸和D-谷氨酸与D-苯丙氨酸对映体。 干，得衍生物 （），进行色谱分析。 图1系用 TPC程序拆 4．贝壳化石氨基酸组分的提取 分这六个对映体的色谱 5克贝壳化石先后用重蒸馏水及0.5 图。 mol/L盐嗡酸超声清洗，滴加6mo1/L盐嗡酸使其 对十八个氨基酸对 全部溶解，在安瓿瓶内加入6mol/L盐酸，于 映体混合液进行色谱分 110℃水解24小时，减压除去过量盐酸，将水 析后，表1列出了两根 解液注入含有Dowex50W-X8(H+树 脂的