脂肪酶催化苯甘氨酸甲酯两对映体的氨解反应-中国科技论文在线.PDFVIP

第 1 5卷第5期 分 子 催 化 Vo】．15．No 5 2001年 10月 1oURNAL OF MOLE(：U1，AR CATALYSIS(CHINA) 0ct． 2001 文童螭号：1 O01—3 555(2001)05 03Z7—04 脂肪酶催化苯甘氨酸甲酯两对映体的氨解反应 杜 伟，李慧青，宗敏华，郭 勇 华南理工太学 生物工程系．广东广州5in640 摘 要 从 6种脂肪酶中筛选出对苯甘氨酸甲酯具有较高氨解反应活性及较高对映件选择性的脂脐酶 Novozym435，井研究了铵盐量、温度 有机溶剂及初始水括度对两种对映件的氨解反应的影响 当以扭丁醇为反 应介质．反应温度为30 C．铵盐量为15 6 mg．初始水活度为0 75时 酶表现出较高的氢船反应活性和对映体选 择性 关 键 词：脂肪酶{氨解反应；苯甘氨酸甲酯 中图分类号：Q939．1 24，O6 43．32 文献标识码：A 非水相酶学的兴起和发展，极大地拓宽了酶的 1实验材料及方法 应用范围，不少酶可在有机溶剂中发挥催化作用， 且表现出许多新特性 ，非水相中的酶催化，已成 1．1材料 为生物催化用于有机合成的重要途径， I ipase OF、]．ipase MY由 日率 Mcito Sangyo 由水解酶催化的立体选择性水解、酯化和转酯 Co，【 td赠送．脂肪酶 Novozym 1 35 c来源于 G 反应，已在外消旋物质的拆分中得到广泛应用 -， dida“ntar~m’d．固定化于大孔阴离子交换树脂J、 近年来的一些研究表明+某些水解酶还可催化一些 脂肪酶 Novozym 87l及脂肪酶 I ipozymc(来源于 非天然酰基受体的转化，如过氧化氢、烷基胺、联 Muco~ miehei，固定化于大孔阴离于交换树脂J为丹 胺和氨等．这些非天然酰基受体的转化反应在多肽 麦 Novo公司赠送．脂肪酶CCI (来源于(a~Mida 的合成、手性羧酸及手性醇的拆分中显示出较好的 c2,lindracga)、R、S一苯甘氨酸甲酯及氨基甲酸馈购 应用前景，其中，以氨为酰基受体的酶催化氨解反 自Sigma公司．其它均为市售分析纯试剂， 应，为功能性酰胺的合成提供了行之有效的途径， 1．2方法 且可用于手性酯、酸、醇类化合物的动力学拆分， l_2．1有机溶剂脱水 将 ^分子筛于180 C干 是一制备光学纯化合物的新反应 “]．目前国际上 燥箱内活化2 h后置干燥器中冷却．将其加人有机 对该反应的研究尚属起步，国内未见有对该反应研 溶剂中，在室温振荡48 h后滤去分子筛，得脱水有 究的报道． 机溶剂． ( ．S)一苯甘氨酸是半合成口一内酰胺类抗生素 1．2．2脂肪酶催化氨解反应 在50mI，带塞三角 的重要中间体，由它拆分得到的 一苯甘氨酸是氨 瓶中分别装人l0．1 mg R及 一苯甘氧酸甲酯、一 苄青霉素、头孢氨苄和头孢拉定等药物的重要侧 定量的氨基甲酸铵、40 I 甲醇(助溶)、20 I 十四 链． 一苯甘氨酸一般是由苯甲醛和氰化物加成再水 烷(内标)及10 ml 脱水叔丁醇．然后加酶50 mg开 解，即经streckers反应合成，存在成本高、毒性大 始反应，在30 C，以50 r／rain振荡．定时取样 20 等缺点口]．我们探讨利用脂肪