微生物原生质体融合2.pptVIP

第十二章 工业微生物原生质体融合育种 与常规杂交相比，原生质体融合具有以下优势： 1. 大幅度提高亲本之间重组频率（10-1） 2. 扩大重组的亲本范围（远缘间产生融合子） 3. 原生质体融合时亲本整套染色体参与交换，遗传物质转移和重组性状较多，集中双亲本优良性状的机会更大。 三、原生质体融合 (一) 原生质体融合过程 霉菌：两亲株原生质体混合于高渗稳定液中?在PEG的诱导下，两个或两个以上凝聚成团?相邻原生质体紧密接触的质膜面扩大，相互接触的质膜消失?细胞质融合，形成一个异核体细胞?异核体的细胞在繁殖过程中发生核的融合，形成杂合二倍体?通过染色体交换，产生各种融合子(fusant)。 (二) 原生质体融合的影响因素 1. 融合剂 化学融合剂：PEG，分子量4000～6000 物理融合剂：电场和激光 2. 温度 3. 亲株的亲和力和原生质体的活性 4. 无机离子 5. 其他条件 (二) 融合体的检出与分离 原生质体融合后产生两种情况，一种是真正的融合，即产生杂合二倍体或单倍重组体；另一种是暂时的融合，形成异核体 。两者均可以在选择培养基上生长，一般前者较稳定，后者不稳定，会分离成亲本类型，有的甚至以异核状态移接几代。因此，要获得真正的融合子，必须在融合原生质体再生后，进行几代自然分离和选择，才能加以确定。 1. 利用营养缺陷型标记选择融合体 2. 利用抗药性选择融合体 3. 用灭活