蛋白质的分离纯化-生命科学学院.pptVIP

蛋白质的分离纯化 （一）材料 1、选材 2、破碎 3、混合物的分离 （二）粗分级 （三）细分级 （四）结晶 蛋白质的分离方法 根据蛋白质的溶解度差异分离 —沉淀技术 根据蛋白质分子大小的差异分离 根据蛋白质的荷电差异分离 根据蛋白质与某些物质的吸附差异—吸附分离 利用生物分子专一性结合的特性—亲和层析 1、可逆沉淀： 等电点沉淀、盐析法、有机溶剂沉淀 2、不可逆沉淀： 热变性沉淀、重金属盐沉淀、有机酸沉淀 透析——只用于除盐类和小分子杂质 超过滤--除小分子杂质，分离、浓缩蛋白质 凝 胶 层 析 又叫分子筛层析。 分子筛是具有三维空间网状结构的物质，有天然的，也可人工合成。根据网孔不同可制成不同规格。 具备条件：1、惰性， 2、水不溶性， 3、能高度水化。 常用分子筛：1、葡聚糖凝胶（Sephadex） 型号：G200、 G150、 G100、 G75、 G50、 G25、 G15 分离大蛋白质 小蛋白质 除盐 2、琼脂糖凝胶（瑞典Sepharose