减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的人血小板第四因子活性片断（PF4-f）的双功能作用研究-内科学(科研型)专业论文.docxVIP

中国协和医科大学中国医学科学院硕士学位论文减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的人血小板第四因子活性片断 中国协和医科大学中国医学科学院硕士学位论文 减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的人血小板第四因子活性片断 (PF4一f)的双功能作用研究 摘要 在癌症治疗中，正常组织的放射保护和联合抗血管新生治疗均能增加肿瘤 的治疗效果。本实验中我们运用减毒的鼠伤寒沙门氏菌菌株SL3261作为基因 治疗的载体，探讨运用人血小板第四因子活性片断(PF41 7-70)进行基因治疗的 生物学作用。给予口服携带人血小板第四因子活性片断的减低沙门氏菌后，接 受亚致死剂量全身照射的小鼠的生存率提高了50％。在7天和14天时小鼠的 骨髓细胞数明显高于对照组(15．6士1．53，21土6．24 vs 4．08±2．05，4．65±O．98 ×105。P《O．05)。7天和14天时骨髓细胞CFU．Mix和CFU．GM高于对照组 (11．7±5．5，22．3±2．1 vs4．3±4．1，4．3±2．3；6．6±2．1，15．3±0．58vs 3．3士2．08， 1．7士0．58 P0．05)。这说明减毒沙门氏菌介导的PF417．70能够促进放射损伤后 小鼠的造血恢复。当沙门氏菌介导的PF417_70的基因治疗和肿瘤的局部放射治 疗联合应用时，相对于单独放射治疗而言，肿瘤的生长减缓了40％。肿瘤的微 血管密度降低了，TUNEL分析显示肿瘤内的凋亡增加。应用RT_PCR和组织 化学染色我们检测到喂饲SL3261，PF417_70小鼠肿瘤组织内PF417-70的表达。 荧光示踪显示喂饲SL3261，PF417．70后小鼠肿瘤组织内的绿色荧光蛋白的强度 明显高于小鼠肝、脾、小肠、肌肉等其它组织。实验结果表明减毒沙门氏菌介 导的PF417-70具有放射保护作用，并能增加肿瘤的放射治疗效果，减毒沙门氏 菌可以作为基因治疗的载体。 【关键词】基因治疗造血抗血管新生放射治疗减毒沙f]氏菌 中国协和医科大学中国医学科学院硕士学位论文Live 中国协和医科大学中国医学科学院硕士学位论文 Live Attenuated SaImonel la Carrying Human PIateIet Factor 4 fragment as a duaI bioIogical function Agent． ^bstract In cancer therapy，both speci们c radiOprotection of nOrmaI“ssues and antiangiOgenesis therapy are the ways to inc陀ase the佑peu百c gain．Here we descrIbe a noveI gene therapy，which uses attenuated saImOne¨a SL3261 as OraJ vectOrs for targeted gene deljve吖and proteGts mice from ir陷dia“On damage and．nc怜ases tumOr陀sponse to lOcaI tumOr jr陷diatiOn．，辅甜O阳l administratlons Of SL3261 carryi九g cDNA of a truncated pIateIE踺factOr 4 (SL3261，PF417．70)．the surviVal rate of mice which re∞iVed subIethaI totaI bOdy irradiation(TBI)was increased by 50％，ln cOmparisOn with the cOntr0I mi∞．The number of bone marrow ce雌s Obtained from the mice of expenmentaI group increased(15．6±1．53，21±6．24 Vs 4．08±2．05，4．65±0．98 ×1 05，P0．05)at day 7 and day 1 4 after TBI compared with that of the controI mice，the number of hematopoiet．c stem，progenttor ce¨s(争Kit and Sca一1 dual positive)lncreased at day 7 and day 14， and the number of CFU—Mix (1 1．7±5．5，22．3±2．1 vs 4．3±4．1，4．3士2．3 PO．05)and CFU-GM(6．6±2．1，1 5．3 ±0．58 vs 3．3±2．08，