减毒麻疹病毒、减毒水痘病毒在体内外对HBV复制的影响-内科(传染病学)专业论文.docxVIP

中山丈学硕士学位论文 中山丈学硕士学位论文 减礴麻疹病毒、减毒水痘病毒在体内外对船v复制的影响 嚣种以上病毒感染同一绍烹膝发生干找的现象及其发生枕制被 越来越多缝褒察妥露进嚣奄}}究，扶这一愚鼹赛发，懿果将一耱螯众、 减毒熬淫痪毒接耱HBV镬稳慧裟寤主，造减重叠感染，穰焉羲嚣触 发豹细胞免疫水平增强、及瘸凑阋多种直接撩剃豹机裁，达到拯制 甚至清除HBV感染的目的，这一结果对治疗慢性HBV感染者舆宵 极为重要的意义。为此，我们选择了DNA和R．NA两种活病簿，夜 体内和体外对其影响HBV复制的情况进行观察研究。 材料与方法 本研究的体内实验采用了鸭乙肝模型作为观察对象，将感染鸭 己型翳炎癍毒(DHBV)的一疆龄雄健龙岩麻鸭睫枫为分5缀，糊麻 疹病毒缝、拳痘瘸毒A缍、承瘢瘸毒B缝、无蓼乌萤缝(辍魏瓣鼹 缀)、空白对照组，按照稠应裁爨分鬟在1、4、12、18天接秘减毒 麻疹病毒、减毒水痘病毒。无环岛营组在感染后10天开始团服獗环 鸟苷100mg／kg／日，疗程10天。空白对照组以等量的生理盐水肌注。 各组分别在接种(给药)前、按种(给药)后5天、10天及宋次按 种(给药)后3天抽取静脉m，鼹一70℃保存待检。在接种期间同 时观察鸭是否出现毒副反应。如步态、食欲、精神状态等。实骏结 束后统一检测血清DHBV DNA，势对结果进行统计分析。 体外实验采用HepG2．2．1 5纲藏l乍尧蕊察对象。尾0，06％胰溪露 薅穆2。2。15缨蕤势数裁擎令绥耱惑滚，接缀建3×104／梵努熊耱予 96孑L板上，2天嚣接季孛病毒，减毒寐疹病毒分为6个浓凌，分剜是 l。0．O．031人份／ml，每个浓度4孔。减毒水痘病毒分为7个浓度，分 别是100—1．56pfu／ml，每个浓度4孔，另外设对照孔。接种瘸懑 后第12天留取细胞培养上清液，罱一70℃保存待检。同时以50 pfu／ml的减毒水痘病毒量接种2．2．1 5细胞，隔日留取细胞培养上清 液并收获部分细胞，观察细胞生长状态、摄片，至第1 8天结束。待 实验结束后，统一检测上清液中HBsAg、HBeAg和培养细胞中的 HBV DNA，荠对结果进行统计攀分瓠。 痪庆淦疗罄徐选择1997零3舅至10嚣奁枣簧粢瘸貔襞魏豹疆 Ii 中山人学硕士学位论文 中山人学硕士学位论文 减毒麻疹病毒、减毒水痘病毒在体内外对HBV复制的影响 性乙型肝炎患者19人，其中男11例、女8例，平均年龄31．1岁。 按照1995年第五次全国传染病和寄生虫病学术会议修订的病毒性肝 炎防治方案的标准，其中符合轻度5例、中度14例，所有病例均为 HBeAg(+)、HBV DNA阳性，排除其他病毒性、药物性肝炎。另以 同期住院的20例慢性乙型病毒性肝炎患者作为对照组。两组年龄、 性别、肝功能、病毒水平匹配。治疗组在常规护肝治疗基础上，每 周两次注射减毒麻疹疫苗0．5ml／次，共12周，然后随访至48周。 对照组仅接受常规护肝治疗。两组分别在0，2，4，8，12，24，48 周时抽血检测T淋巴细胞亚群，同时保留血清，置一70℃冻存各检。 结果 1、在鸭乙肝模型上观察到， 麻疹病毒组在末次接种后3天血清 DHBV DNA显著下降，与接种前比较，差异有显著性(t=3．32， P0．01 1；水痘病毒A组在接种后第5天DHBV DNA开始下降， 第10天时显著下降，与接种前比较，差异有显著性(t=3．5l，P 0．01)，并持续至末次接种后3天；水痘病毒B组在末次接种后3天 血清DHBV DNA下降，与接种前比较，差异有显著性(t=3．46， P0．01)。 2、体外细胞培养发现减毒麻疹病毒对2．2．15细胞分泌HBsAg和 HBeAg均有直接抑制，最大抑制率分别为80％年n 87％，并与剂量成 正相关。水痘病毒对HBeAg有抑制，抑制率最大31％。抑制程度与 接种病毒量无关。对HBsAg无显著抑制。以细胞提取物检测HBV DNA，结果显示水痘病毒对2．2．1 5细胞内HBV DNA未见有明显影 响。 3、有活跃病毒复制的慢乙肝患者在接种减毒麻疹病毒后T淋巴细胞 亚群间的比例发生改变，CD4+／CD8+比值的平均值由1．05±0．19升 至随访结束时1．47±0．1 8，差异有显著性 (f=5．36，P0．01)，部 份患者观察到血清白介素2和r—INF升高。随访结束时，治疗组 HBeAg平均值由283．90±1 34．88下降至l 39．17±166．66，HBV DNA 阳性率由100％降至63．16％，上述两项指标与对照组相比，差异均 Ill 中山人学硕士学位论文 中山人学硕士学位论文 减毒麻疹病毒、减毒水痘病毒在体内外对HBV复制的影响 有显著性(t=2．