人羊膜间充质干细胞在微载体动态培养体系中的扩-高校化学工程学报.PDF

第25 卷第6 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.6 Vol.25 2011 年12 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Dec. 2011 文章编号：1003-9015(2011)06-0991-06 人羊膜间充质干细胞在微载体动态培养体系中的扩增和成骨诱导分化 周 倩, 周 燕, 叶朝阳, 谭文松 (华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237) 摘 要：人羊膜间充质干细胞 (hAMSCs) 作为一种多潜能干细胞有望应用于骨组织工程。但是，传统的静态培养和诱 导方法并不利于间充质干细胞的体外扩增和成骨分化。实验通过考察和比较在孔板中静态及微载体动态培养条件下 hAMSCs 的扩增与成骨诱导，以建立集间充质干细胞增殖和成骨分化诱导为一体的动态培养体系。将hAMSCs 接种到 Cytodex 3 微载体上，计细胞数，检测成骨诱导分化后细胞的碱性磷酸酶活性与钙基质含量，与二维静态培养系统比较； 另外，基于二维培养体系进一步考察了流体刺激和胶原基质修饰对hAMSCs 成骨分化的影响。结果表明：在微载体动 态诱导培养条件下可获得较高的细胞数和较好的成骨诱导分化效果，提高了碱性磷酸酶活性与钙基质含量；流体刺激 与包被的I 型胶原均可促进hAMSCs 的成骨分化，且两者联合应用时促进作用更明显。因此，基于微载体的动态培养 体系可以促进间充质干细胞在骨组织再生工程中的应用。 关键词：人羊膜间充质干细胞；体外扩增；成骨分化；流体力学刺激；胶原基质 中图分类号：Q813.1 文献标识码：A Expansion and Osteogenic Differentiation of Human Amnion Mesenchymal Stem Cell in a Microcarrier-Based Dynamic Culture System ZHOU Qian, ZHOU Yan, YE Zhao-yang, TAN Wen-song (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China) Abstract: Human amnion mesenchymal stem cells (hAMSCs) are an attractive cell source for bone tissue engineering. However, their utility is restrained by low expansion rate and poor osteogenic differentiation under static culture conditions. In the present study, hAMSCs were seeded and cultured in 12-wells plates as static culture system or Cytodex3 microcarrier-based dynamic culture system. Both proliferation and osteogenic differentiation of hAMSCs in spinner flasks were investigated and compared with those in static plates