健脾益气方药对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其机制的研究-肿瘤学专业论文.docxVIP

河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 一躲铡芝一葛： 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研究生签名：羼蕞鼬?师冬争： 图 √许)乒日 中文摘要健脾益气方药对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响 中文摘要 健脾益气方药对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响 及其机制的研究 摘 要 目的：胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，总体5年生存 率不及30％。目前的治疗方法，包括根治性手术切除、化疗、 放疗及其他综合治疗等，均未能有效提高肿瘤病人的治愈率 和生存率，且大多数病人预后很差。胃癌经常在癌症晚期才 诊断，约有40％一50％患者诊断时己是局部晚期。现代医学实 验和临床研究表明中医脾虚证与胃癌的发生发展有着密切 的关系，且胃癌病人经过治疗后还会加重脾虚，如此恶性循 环。本研究建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察健脾益气 方药及其联合细胞周期特异性化疗药氟尿嘧啶(5．Fu)对移植 瘤裸鼠治疗后的一般情况、皮下移植瘤的生长、肿瘤细胞周 期情况及凋亡率等的影响。 方法： l动物模型的建立 用含10％标准胎牛血清的RPMI．1640培养基在37℃，5％ C02条件下体外培养人胃癌细胞株BGC．803，细胞贴壁生长。 收集对数生长期细胞，建立裸鼠皮下移植瘤模型，作鼠间传 代至第6代。将32只裸鼠麻醉，用瘤株建立动物模型。 2裸鼠分组 将32只裸鼠随机分为阴性对照(生理盐水)组，阳性 对照(化疗药5-Fu)组，中药(健脾益气方药)组和联合用 药(5-Fu+健脾益气方药)组。 中文摘要3裸鼠一般情况观察 中文摘要 3裸鼠一般情况观察 监测裸鼠体质量变化，同时观察裸鼠摄食、摄水和精神 状态等变化。 4肿瘤生长的大体指标 测量裸鼠肿瘤的整体短径、长径，计算瘤体体积；绘制 肿瘤生长曲线；测量瘤质量，计算肿瘤抑制率。 5肿瘤组织学观察 处死裸鼠后，肉眼观察瘤组织；取小块组织常规石蜡包 埋切片，光镜下观察。 6免疫功能检测 处死裸鼠，取脾脏称重；眼球取血约0．15ml，检测NK 细胞百分比。 7流式细胞仪检测 取部分肿瘤组织，制备成单细胞悬液，PI染色后上流式 细胞仪进行细胞周期及细胞凋亡率的测定。 结果： 1裸鼠一般情况观察 化疗药组裸鼠随治疗进行逐渐出现精神萎靡，摄食、摄 水减少。治疗前各组裸鼠体质量无显著性差异。治疗结束时， 生理盐水组、化疗药组、健脾益气方药组、联合用药组体质 量分别为18．86+0．949、16．16-4-1．379、19．40+2．279、 16．384-1．549。与生理盐水组比较，化疗药组、联合用药组裸 鼠体质量减小；与化疗药组相比，中药组、联合用药组裸鼠 体质量增加。 2肿瘤生长分析 2．1裸鼠瘤块体积(V=长径×短径2 cm3／2)的情况 中文摘要治疗前各组肿瘤体积无差别。治疗结束时，生理盐水组、 中文摘要 治疗前各组肿瘤体积无差别。治疗结束时，生理盐水组、 化疗药组、健脾益气方药组、联合用药组肿瘤体积分别为 2．22+0．45cm3、1．66=t=0．60cm3、2．13+0．39cmj、1．08+0．42cmj。 与生理盐水组比较，化疗药组、中药组、联合用药组肿瘤体 积减小；与化疗药组相比，联合用药组裸鼠肿瘤体积减小。 2．2裸鼠瘤质量的情况 治疗结束时，生理盐水组、化疗药组、健脾益气方药组、 联合用药组裸鼠瘤质量分别为2．26+0．239、1．34+0．509、 1．96+0．819、1．00+0．529。与生理盐水组比较，化疗药组、联 合用药组裸鼠瘤质量减小。化疗药组、健脾益气方药组、联 合用药组的抑瘤率分别为40．71％、13．27％、55．75％。 3肿瘤组织学观察 各组肿瘤组织病理切片HE染色均可见大量呈巢状排列 的癌细胞；中央可见癌细胞坏死，且阳性对照组、联合用药 组的坏死区域较阴性对照组、中药组为广泛。 4对裸鼠免疫功能的影响 4．1裸鼠脾脏的质量 四组裸鼠脾脏质量之间差异无统计学意义。 4．2裸鼠NK细胞百分比 治疗结束时，生理盐水组、化疗药组、健脾益气方药组、 联合用药组裸鼠NK细胞百分比分别为5．60+0．26、4．16+0．59、 6．42+0．24、6．02+0．23。与生理盐水组比较，化疗药组、联合 用药组裸鼠NK细胞百分比增加；与化疗药组比较，健脾益 气方药组裸鼠NK细胞百分比增加。 5流式细胞仪检测 5．1 G0／G1期、S期、G2／M期肿瘤细胞百分比 中文摘要对G2／M期肿瘤细胞百分比来说，四组差异无统计学意 中文摘要 对G2／M期肿瘤细胞百分比