微生物的遗传变异现象.PPT

微生物的独特生物学特性： （1） 个体的体制极其简单； （2） 营养体一般都是单倍体； （3） 易于在成分简单的组合培养基上大量生长繁殖； （4） 繁殖速度快； （5） 易于积累不同的中间代谢产物或终产物； （6） 菌落形态特征的可见性和多样性； （7） 环境条件对微生物群体中各个个体作用的直接性和均一性； （8） 易于形成营养缺陷型； （9） 各种微生物一般都有相应的病毒； （10）存在多种处于进化过程中的原始有性生殖方式； 遗传物质在细胞内的存在部位和方式 （一）核酸存在的七个水平及质粒 细胞水平：存在于细胞核或核质体，单核或多核 细胞核水平: 原与真核生物的细胞核结构不同，核外DNA 染色体水平: 倍性(真核)和染色体数 核酸水平：在原核中同染色体水平、存在部分二倍体 DNA或RNA，复合或裸露，双链或单链 基因水平：具自主复制能力的遗传功能单位，长度与信息量，转录——翻译 密码子水平： 信息单位,起始和终止, 核苷酸水平： 突变或交换单位，四种碱基 三、基因重组 同源重组是生物中普遍存在的一种基因重组方式，其特点是可以在任何位置、任何两个具有同源序列的DNA分子之间发生，需要类似RecA的蛋白参与。 位点特异性重组依赖于小范围同源序列的联会，特点是需要在供体和靶分子中包含特定的DNA序列，并且需要特异性的蛋白质因子识别和催化。 转座子是可在一个DNA分子内或不同DNA分子间移动的DNA片段。转座作用即由转座子介导的DNA重排现象，它不需DNA同源性，无RecA参与；转座子的末端带有倒置重复序列，由转座酶识别和切割。 大肠杆菌l噬菌体在特异性位点插入染色体(a)和脱离染色体的方式(b) 位点特异性重组 图8.14 转座子的插入和靶序列正向重复的产生过程。 转座作用 图8.15 四、原核生物细胞间的基因转移 在供体细胞和受体细胞直接接触后，质粒从供体细胞向受体细胞转移的过程叫做接合作用(conjugation)。 转化(transformation)是指细胞从周围介质中摄取来自不同基因型细胞的DNA，使受体的基因型或表型发生相应变化的过程。 转导(transduction)是由噬菌体介导的将DNA片段从供体菌转移到受体菌的过程。 大肠杆菌中的F质粒及其接合作用 图8.16 大肠杆菌l噬菌体介导的转导 图8.17 (a) 普遍性转导 (b) 特异性转导 五、真核微生物细胞间的基因交换 准性生殖与有性生殖的比较 表8.2 第四节 微生物的诱变育种 和遗传工程 一、菌株的诱变和筛选 二、DNA重组技术的发展 三、基因工程 四、生物种系的遗传改良 一、菌株的诱变和筛选 物理致变剂 致变剂 e.g. X-rays, g-rays, UV 化学致变剂 e.g. base analogs, nitrous acid, alkylating, arylating agents UVL VL Photolyase 例：紫外线诱变的分子基础 紫外线诱变的操作步骤 青霉素生产菌的诱变育种 菌株 NRRL-B25 的诱变过程 Strain Mutagen Yield (U/ml) Time NRRL-B25 250 1943 NRRL-X1612 X-rays 500 1943 NRRL-Q176 UV light 850 1945 NRRL-WIS-47-1564 UV light 850 1947 --- --- 50000 1977 对早期生物技术的发展贡献巨大； 适用于途径或基因未得到研究的菌株； 产生的变异程度相对较低； 变异的位点及性质不明； 没有相应的基因就不可能发生新功能。 诱变育种技术的特点 二、DNA重组技术的发展 1. 限制性核酸内切酶 2. 逆转录酶 3. DNA连接酶 4. DNA聚合酶和聚合酶链式反应 1. 限制性核酸内切酶 20世纪60年代末Arber 等发现细菌能够产生识别特定的DNA序列并对其加以切割的酶，即限制性核酸内切酶，简称DNA内切酶。这个发现标记着DNA重组技术的诞生。 工具酶识别序列是4～8个核苷酸，这些位点的显著特点是它们具有双重旋转对称的结构或称回纹结构. 图7.18.(a) 限制性核酸内切酶的切割方式 粘性末端：两条单链上的断裂位置交错且对称，所产生的两个末端含有单链的互补序列。 平端切割：两条单链上的断