双色FISH和DNA纤维FISH方法的建立与应用-遗传.PDFVIP

遗 　传 H ER EDI TA S ( B eij ing) 25 ( 1) :1～4 ,2003 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　研究报告 双色 FISH 和 D NA 纤维 FISH 方法的建立与应用 李永青 ,朱传炳 ,袁婺洲 ,王跃群 ,吴秀山 (湖南师范大学生命科学学院 ,长沙 4 10081) 摘 　要 :在构建了含毛细胞白血病相关的结构性倒位 inv (5) (p 13 . 1q13 . 3) 的细胞系后 ,为了确定该新建细胞系在 建株过程中其倒位断裂点关键区遗传物质是否发生改变 , 以生物素或地高辛标记的 cCI5 - 2 16 和 cCI5 - 267 黏粒 DNA 为探针 ,进行染色体中期 、间期和 DNA 纤维 3 种双色荧光原位杂交的分析 。结果表明:该新建细胞系的 3 种 双色荧光原位杂交结果 ,均与该细胞系的原代细胞的完全相同 ,证实了该细胞系倒位断裂点关键区的遗传物质结 构未发生改变 。该细胞系是揭示毛细胞白血病发病的分子机理的重要研究材料 。 关键词 :毛细胞白血病 ;结构性倒位 ;细胞系 ;双色荧光原位杂交 中图分类号 :Q343 . 5 　　　文献标识码 :A 　　　 文章编号 :0253 - 9772 (2003) 0 1 - 000 1 - 04 Establ ishment and Appl ication of Double Color and FiberFISH L I YongQing , ZHU ChuanBing , YUAN WuZhou , WAN G YueQun ,WU XiuShan ( College of L if e S ciences , H u nan N orm al University , Changs ha 4 10081, Chi na) Abstract :To determine whet her genetic material in 5q13 . 3 breakpoint region changed in t he course of establishing t he cell line wit h a constitutional chromosomal inversion inv (5) (p 13 . 1q13 . 3) associated wit h hairy cell leukemia ,double color flu orescence in sit u hybridization ( F ISH) on metap hase ,interp hase and DNA fibers were p erformed in cells of t he cell line wit h t he cosmids cCI5 - 2 16 and cCI5 - 267 DNA probes labeled by eit her biotinylate or digoxigenin . It showed t hat t he cell line gave t he same result s as t hose of t he original cells ,which indicated t hat no change of t he genetic material at 5q13 . 3 breakpoint region occurred . The cell line is valuable to reveal t he molecular p at hogenesis of hairy cell leukemia . Key words :hairy cell leukemia ;constitutional chromosomal inversion ;cell line ;double color F ISH (