第十二章-核酸的生物合成(DNA-RNA)-wl.pptVIP

（四）原核生物和真核生物的转录调控的特点 转录调控共同点： 1）调控关键步骤均在转录起始阶段； 2）DNA上均包含顺式作用元件，细胞中则含有反式作用因子。 原核生物转录调控特点： 1）σ因子决定RNA聚合酶识别特异性； 2）操纵子模型普遍，多顺反子mRNA； 3）阻遏蛋白与阻遏机制普遍。 真核生物转录调控特点： 1）复杂的染色体结构变化对基因转录调控有影响； 2）真核生物有更多的顺式作用元件和反式作用因子，调控更复杂； 3）反式作用因子多是正调控，需要多个反式作用因子； 4）未发现操纵子模型，功能基因协调表达比原核更复杂。 （五）转录的选择性抑制 放线菌素D 抑制RNA聚合酶链的延长； 吖啶类 抑制RNA聚合酶链的延长； 利福平 特异的与原核RNA聚合酶的β亚基结合，阻止转录起始； α-鹅膏蕈碱 阻断真核RNA聚合酶II催化的mRNA合成。 （六）转录产物的加工 mRNA的加工 帽子结构提高mRNA稳定性，翻译起始阶段起到重要作用； 多聚A尾巴提高mRNA稳定性，维持翻译模板活性。 并且具备选择性剪接 外显子跨跃 外显子延长 内含子保留 外显子交替 RNA编辑 是指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。具体说来，指基因转录产生的mRNA分子中，由于核苷酸的缺失，插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列互补，使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信息现象。 gRNA rRNA的加工 tRNA的加工 （七）RNA的复制 （八）RNA的无模板合成 多核苷酸磷酸化酶可以催化核苷二磷酸随机聚合成核苷酸链的反应，不需要模板，产物的碱基组成取决于核苷二磷酸的种类和比例。目前仅在细菌中得到该酶。 朊病毒朊病毒又称蛋白质侵染因子（又称毒朊或感染性蛋白质）。严格来说不是病毒，是一类不含核酸而仅由蛋白质构成的可自我复制并具感染性的因子。 * 胸腺嘧啶二聚体 重组修复 SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式，修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复（error-prone repair），使细胞有较高的突变率。 （六）DNA重组和克隆 同源重组（一般性重组）：指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组形成Holliday结构（Holliday Juncture Structure) 。 位点特异性重组：这类重组依赖于小范围同源序列的联会，重组也只发生在同源的短序列的范围之内，需要位点特异性的蛋白质分子参与催化，重组时发生精确的切割、连接反应，DNA不失去、不合成。两个DNA分子并不进行对等的交换，有时是一个DNA分子整合到另一个DNA分子上，因此将这种形式的重组又称为插入重组。 生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶(简称限制酶)。 作用特点： 1. 有严格的识别、切割的DNA序列，并以内切的方式水解双链DNA分子中的磷酸二酯键，产生的DNA片段5’端为P，3’端为OH。 2. 识别序列一般为4～6个碱基对，并以切割序列的正中作为轴心，成180°反向重复(inverted repeat)。这种结构也称为回文结构(palindrom)。 3. Ⅱ型酶切割靶序列的大小决定了切割DNA链后产生的DNA片段的长短，即识别序列短，则DNA链中可能存在的切点多，产生DNA片段短；识别序列长，则DNA链上存在的切点少，产生DNA片段长。按照识别序列的长短可估算RE对DNA的切割概率。如：识别4bp的某RE，其切割概率为1/44=1/256，即平均相距256bp有一个切割点；识别序列为6bp的RE，其切割概率为1/46=4096。 4.切割后产生平头或粘性末端。 5.Ⅱ型RE酶只需Mg2+， 不需ATP。 (1) 同裂酶(isoschizomer)：又称异源同工酶，即从不同原核生物中分离 出来的不同的Ⅱ型酶有相同的识别特点，但切割位点可以相同，也可以不 同，例如Sam I(CCC↓GGG)和Xma I(C↓CCGGG) (2)同尾酶(isocaudarmer)：不同来源的酶其识别和切割序列有一定的相关性，作用后能产生相同的粘性末端。同尾酶产生的DNA片段能通过粘性末端之间的互补作用而彼此连接起来，这在分子克隆中有一定的作用。 (3)可变酶：此种酶所识别DNA序列中的一个或几个碱基是可变的，并且识别序列往往超过6个碱基对，例如Bstp