琼脂糖分离介质征求意见稿编制说明-中国标准化研究院.DOC

PAGE 1 PAGE 4 琼脂糖分离介质 （征求意见稿） 编 制 说 明 《琼脂糖分离介质》 国家标准起草工作小组 二〇一九年一月 《琼脂糖分离介质》国家标准 编 制 说 明 （征求意见稿） 一、任务来源 本国家标准的制定任务列入国家标准化管理委员会专项《国家质量基础的共性技术研究与应用》项目《生物产业共性技术标准研究》中课题《海洋生物产品质量控制与检测技术标准研究》，项目编号“2016YFF0202304”。本项任务由中国标准化研究院提出并归口，定于2019年完成。本标准起草工作组由中国科学院过程工程研究所等单位共同组成。 二、目的和意义 琼脂糖是一种天然多糖，系以海洋植物石花菜或江蓠等红藻提取出的琼脂为原料，经精制加工而成。琼脂糖在温度较高时可以溶于水，形成琼脂糖水溶液，在冷却过程中则形成凝胶。琼脂糖凝胶含有大量能允许大分子扩散的孔道。因此琼脂糖能够很好的满足层析介质的制备要求，制成的琼脂糖分离介质具有很多优点。例如，羟基密度大，亲水性好，可以被取代的基团多，易于活化，制备介质载量高，丰富的孔道结构、非特异性吸附低、稳定性好等。自20世纪60年代琼脂糖层析介质出现至今，在琼脂糖凝胶过滤介质上衍生得到的各种功能性分离介质已广泛应用于分离纯化领域，如离子交换层析、疏水层析和亲和层析等，分离对象涉及蛋白质、核酸、肽类和糖类等多种物质，广泛应用于生物制药、食品工业及化工等领域。琼脂糖分离介质及相关装备年销售额达数百亿元。 图1 琼脂糖结构式 A B 图2 琼脂糖凝胶结构(A)琼脂糖凝胶结构示意图; (B) 2%琼脂糖凝胶扫描电镜图 当前，琼脂糖介质应用需求旺盛，国内外介质生产厂家众多。但是，由于琼脂糖分离介质尚未建立相应的国家标准，生产和应用环节都缺少统一的性能参数要求和检测标准，进而缺少生产、检验和评定质量的依据和规范，造成介质质量水平参差不齐，国内市场基本都为欧美介质厂家垄断。这不仅阻碍了层析介质及相关技术的应用，更在一定程度上限制了我国生物技术行业的发展，最终在科研水平、经济层面和国家安全性等方面都产生不利影响。建立琼脂糖分离介质国家标准，不但能够规范琼脂糖分离介质的生产与检验，提高层析介质产品的质量、安全和卫生水平，为生物技术下游科学研究及生产带来很大便利，同时，对推动我国分离介质及相关产业发展，并在国际上占有一席之地也具有重要意义。 三、标准制定原则 （一）标准编制原则 琼脂糖分离介质属于生物体系分离材料，重点围绕介质的主要性能要求，设定相应技术内容。在确保产品质量的基础上，充分体现产品的特点。 （二）标准制订主要依据 1、标准编写遵循GB1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的有关要求。 2、标准编写内容参考我国与化学品相关的法规、标准，包括GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备、GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备等等。 四、标准主要技术内容 （一）标准适用范围的说明 本标准规定了琼脂糖分离介质的质量要求、检测方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存的标准。本标准适用于骨架为琼脂糖微球的分离介质的生产与检测。 （二）内容提要 琼脂糖分离介质的主要理化性质包括外观、粒径、流速、固含量、分配系数、非特异性吸附、微生物污染和化学稳定性等。 2.1 外观 2.1.1 方法提要 采用光学显微镜观测琼脂糖分离介质的外观形貌。光学显微镜使用普及率高，可观测范围一般在数微米到数百微米之间，样品处理过程和观测过程都简便易行，观测结果清晰、重复性好，是常用的材料外观表征方法之一[1]。琼脂糖分离介质的外观形貌主要包括球形和透明性，其尺寸大小在光学显微镜的测量范围内[2]。 2.1.2 试剂和材料 实验用水应符合GB/T 6682-1992中三级要求。光学显微镜。砂芯漏斗为G3（4.5-9 μm）。真空泵极限真空0.1MPa。 2.1.3 样品前处理 用量筒量取5 mL琼脂糖白球，置于50 mL砂芯漏斗中。用三级水清洗5次每次2 min，抽干5 min。将洗净的琼脂糖白球置于烧杯中，琼脂糖白球上应有2 cm的三级水。混匀后得到琼脂糖白球与水的混合体系。 2.1.4 样品观测 用塑料吸管吸取1 mL琼脂糖白球与水的混合体系置于载玻片上，调整显微镜放大倍数。以视野里80%以上面积均为白球为标准，用塑料吸管增减载玻片上的微球，最后用盖玻片压上。调节光学显微镜焦距，使视野中的影像清晰。拍摄琼脂糖白球照片并保存。 图3 琼脂糖白球光学显微镜照片 2.1.5 方法验证 为了确定检验方法，标准起草单位已委托三家单位对方法进行复核验证。 2.2 粒径及其分布 2.2.1 方法提要 粒径和粒径分布是微球最基本的性质参数，对流速和分辨率均有重要影响[1]。琼脂糖分离介质是球形颗粒，其大小用直径