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柱色谱分离
* 红辣椒中色素的分离 实验目的和要求 1、复习色谱法基本原理 2、巩固薄层色谱、柱色谱的规范操作 3、学习并掌握湿法装柱的要点 实验原理 1、色谱法的基本原理 2、薄层色谱、柱色谱的含义 3、红辣椒中主要色素的结构式及名称 红辣椒含有多种色泽鲜艳的天然色素,其中呈深红色的色素主要是由辣椒红脂肪酸酯和少量辣椒玉红素脂肪酸酯所组成,呈黄色的色素则是β-胡罗卜素。它们都属于类胡萝卜素类化合物,从结构上看则都属于四萜类化合物。 本实验是用二氯甲烷为萃取剂,从红辣椒中萃取出色素,经浓缩后用薄层色谱法作初步分析,再用柱色谱法分离第一个色带(什么色?)。 主要试剂的物化常数 二氯甲烷 石油醚 硅胶G 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液 主要仪器 色谱柱、薄层板(2块)、 整套回馏装置用仪器、过滤用仪器等 本实验要求必画的装置图 柱色谱洗脱装置 薄层板展开装置 回馏提取装置等 实验操作步骤 1、洗、铺薄层板(称1.5克硅胶G,加4.5毫升0.5%CMC), 晾干后活化0.5h 2、称取1.0g粉碎红辣椒并提取 3、抽滤冷却的提取液,收集滤液于小烧瓶中,备用 4、在活化好的薄层板上画线、点样、展开、测Rf值, 将此板的真实情况画在报告纸上 5、湿法装填色谱柱,装样、洗脱、收集黄色液 6、取另一块薄层板,鉴定黄色成分与混合样中黄色斑 点的Rf值是否一致,将此块板的展开情况也画在报告上 7、洗板、洗柱子、整理实验台 1、制板: 洗净并铺薄层板2块(称1.5克硅胶G,加4.5毫升0.5%CMC),晾干后活化0.5h 2、色素的萃取和浓缩: 将干的红辣椒剪碎研细,称取1.0g,置于25mL圆底烧瓶中,加入10mL二氯甲烷和1粒沸石,水浴加热回流20min。冷至室温后过滤。将滤液浓缩至剩约1mL,即为混合色素的浓缩液。 *
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