木糖还原酶基因在大肠杆菌中活性表达-华侨大学学报自然科学版.PDF

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木糖还原酶基因在大肠杆菌中活性表达-华侨大学学报自然科学版

29 3 ( ) Vol. 29 No . 3 2008 7 Journal of H uaqiao University ( Natural Science) Jul. 2008 : 000-50 3( 2008) 03-0383-04 王晓霞, 方柏山, 李雯君 ( , , 36202 ) : ( PCR) , ( Cand ida shehatae) DNA (Xylose Reduct ase, XR) , . 6 h XR , 20% . -B- D-( IPT G) , , 232. 38 Lkat # g- , IPT G 206.04 Lkat # g- . : ; ; ; ; : T Q 923; Q 789 : A ( ) , , - [ ] , . , , , . [ 2-3] , . , , . , . , , , [ 4] [ 3] , . , , , . ( C. shehat ae CICC 766) ( XR) xr , , -B-D-( IPT G) , E. col i . 1 1. 1 C. shehatae CICC 766( ) , E . col i DH5A ( ) , pET-22b( ) ; E. c ol i BL2 ( DE3) plysS( E. col i , ) ; T aqTM DNA NdeÑBamH Ñ(TA KARA ) ; T4 DNA ( PROMEGA ) ; ( OMEGA BIO-T EK ) ; GeneRulerTM Ladder Mix( ) ; I( N ADH, AM RESCO ) . , . 1. 2 : 2007- 0-08 : ( 98 -) , ; : ( 957-) , , , , . E- mail:fangbs@ hqu. edu. cn. : ( C96068) 384 ( ) 2008 . 2. 目的基因的克隆及序列分析 ( NCBI) C. she hatae CS05 , . : 5.- AT CCA TAT GAGCCCAA GCCCAATT CC-3. ( NdeÑ) . : 5.- CCCGGAT CCAACAAGCACGCT TAAACGA-3. ( BamH Ñ) . C. shehatae DNA , PCR 1 : 94 e 4 min, 94 e min, 54 e min, 72 e 2 min( 30 ) , 72 e 0 min. . 2. 2 表达载体 pET 22-xr 的构建及在E. col i 中的表达 PCR % , PCR pET-22b NdeÑBam H Ñ, T 4 DNA . E. col i DH5A, NdeÑBamH Ñ. pET 22-xr E. c ol i , 37 e A 600 0. 6~ 0. 8

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