支原体10CFU灵敏度标准品.DOCVIP

上海威正翔禹生物/北京缔一生物科技有限公司 北京公司地址：朝阳区酒仙桥东路9号京仪融创孵化器710室 电话：010上海公司地址：徐汇区斜土路1223号之俊大厦1801室 电话：021官网：HYPERLINK 邮箱：vs8686@ 支原体10CFU?灵敏度标准品 (货号：102-0002) 用途： 原装进口的德国Minerva Biolabs公司支原体10CFU?灵敏度标准品，用于以核酸为基础的支原体检测的功能验证和灵敏度验证。 试验说明： 根据《欧洲药典》第2.6.7章，对于以核酸为基础的检测方法如PCR，为了取代传统培养的方法，支原体检测的灵敏度需要达到为每ml样本10个集落形成单位（CFU）。对于任何特定的样本基质，这项灵敏度的验证需要作为功能试验的一部分加以完成。 对于大多数细胞培养实验室，根据安全性的法规，存在活的支原体是不可接受的。我们10CFU?灵敏度标准品的支原体不是活支原体，可使验证试验安全而可靠的进行。 正如《欧洲药典》第2.6.7章所描述的那样，支原体先在培养基中生长，随后稀释并接种在Hayflick和Frey培养基中，用于确定CFU集落数。在生长的早期对数期进行支原体的收集，以保证活支原体对死支原体的高比例，以及基因组单位对CFU的低比例。所有菌株均来自英国的菌种保藏中心NCTC，并且传代次数很少。相应的NCTC编号和ATCC编号列在试剂表中。 试验的原理： 每管包含10CFU不可逆灭活的支原体。因而支原体不可用于培养法。简要而言，根据欧洲药典第2.6.7章，一个样本是通过添加待测样品的基质而完成制备。 样品在做PCR扩增前，需要先做DNA抽提。正如几个独立实验室检测所示，为了达到最高灵敏度，DNA抽提是必要的。使用我们的支原体DNA提取试剂盒（Venor?GeM Sample Preparation Kit）可以轻松完成DNA抽提。提取的DNA即可直接用于PCR。要符合欧洲药典标准，PCR检测应显示为阳性扩增。 请注意：我们的10CFU?灵敏度标准品是依据集落形成单位进行的标定，而非依据基因组拷贝数，正如欧洲药典第2.6.7章也不包含有关DNA含量的详细信息。我们没有提供基因组单位对CFU的比例，因为该比例在不同批次间可能有变化。 试剂表： 试剂盒组分 数量 NCTC编号 ATCC编号 货号 精氨酸支原体 3管 10129 23838 102-1003 口腔支原体 10112 23714 102-2003 鸡败血支原体 10115 19610 102-3003 肺炎支原体 10119 15531 102-4003 关节液支原体 10124 25204 102-5003 发酵支原体 10117 19989 102-6003 猪鼻支原体 10130 17981 102-7003 莱氏无胆甾原体 10116 23206 102-8003 螺原体 10164 27556 102-9003 阴性对照 2管 -- -- -- 10CFU?支原体套装（货号102-0003）包含有欧洲药典第2.6.7章列出的各种支原体2管（总共18管）和阴性对照2管。 支原体直接用培养基稀释，保证每个支原体细胞的完整性，随后用10mM Tris缓冲液（pH 8.0）稀释10倍，避免培养基对PCR试验的不良效应。所有样品菌均为冻干形式，以保证产品的稳定性。 支原体在冻干前进行了灭活。支原体的灭活经Hayflick和Frey培养基在37℃（螺原体在30℃培养）培养23天所证实。采用Venor? GeM qEP Mycoplasma Detection Kit进行定量PCR，以监测生长状况。 未开封产品的效期在包装标签上。试剂盒组分必须在2～8℃保存，直到使用。每个批号的产品均可在Minerva厂家网站下载质控证明：HYPERLINK 需用户自己提供的耗材和仪器 试剂盒包含的试剂，用于制备有支原体颗粒掺入的样品。任何其他普通实验室仪器和消耗品如PCR试剂，由用户自己提供。 注意事项 10CFU?灵敏度标准品只适合体外，由有经验的实验室人员使用。试剂盒不包含有害物质。残留物可以根据当地法规的规定处理弃掉。 试验步骤 所有试剂盒样品在试验开始前，均应放置片刻，达到与室温平衡。 1. 管离心，以收集冻干粉至管底。 2. 每个管中添加1ml你的样品基质。 3. 室温孵育5分钟。 4. 涡旋振荡10秒，再离心10秒。 5. 使用适当的体积用于DNA抽提。我们推荐使用我们的支原体DNA提取试剂盒（即Venor?GeM Sample Preparation Kit）。 6. 使用适当体积的提好的DNA用于PCR扩增。 阴性对照样品的制备，和支原体灵敏度标准品的制备一样，但它不