基于靶器官的急性移植物抗宿主病危险因素分析及类胰蛋白酶在其中的生物学意义探讨-内科学(血液病学)专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE PAGE 1 中英文缩略词表 简称 英文 中文 aGVHD Acute graft versus host disease 移植物抗宿主病 tryptase Tryptase 类胰蛋白酶 Allo-HSCT Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation 异 基 因造 血干 细胞 移 植 AML Acute myeloid leukemia 急性髓细胞性白血病 ALL Acute lymphocytic leukemia 急性淋巴细胞白血病 CML Chronic myeloid leukemia 慢性粒细胞性白血病 MDS Myelodysplastic syndrome 骨髓增生异常综合征 NHL Non-Hodgkin lymphoma 非霍奇金淋巴瘤 AA Apnastic Anemia 再生障碍性贫血 MCP-6 Mast cell protease 6 肥大细胞胰蛋白酶 6 MCP-6 Mast cell protease 7 肥大细胞胰蛋白酶 7 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 ELISA Enzyme linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验 IL-33 Interferon 33 白介素 33 PBS Phosphate Buffer 磷酸盐缓冲液 MC Mast cell 肥大细胞 LPS Lipopolysaccharide 脂多糖 TLR4 Toll like receptor 4 Toll 样受体 4 IFNγ Interferon γ 干扰素γ PAR-2 Protease activated receptor 2 蛋白酶活化受体 2 PAR-1 Protease activated receptor 1 蛋白酶活化受体 1 基于靶器官的急性移植物抗宿主病危险因素分析及类胰蛋 白酶在其中的生物学意义探讨 硕士研究生：关 军 导 师：张义成 教 授 华中科技大学同济医学院附属同济医院血液内科 摘 要 目的 研究急性移植物抗宿主病（aGVHD）靶器官损伤的危险因素，探讨类胰 蛋白酶在靶器官损伤中的意义 方法 （ 1 ）收 集 2003-2012 年 在 武汉 同济医 院 行 异基 因造 血 干细 胞 移 植 （allo-HSCT）的 214 例患者资料，对患者急性 GVHD 总分度及各靶器官包括胃 肠道、肝脏、皮肤损伤程度进行评估，分析原发疾病、性别、年龄、预处理强 度、供者类型、CD34+细胞数及预处理方案中是否应用 ATG/ALG 等因素对其发 生的影响，评估不同程度靶器官损伤对免疫治疗的反应。 （2）收集 2010-2013 年在我院进行 allo-HSCT 后患者的 46 例外周血样 本，分为两组：胃肠道 GVHD 组（21 例）和无胃肠道 GVHD 组（25 例），应用酶 联免疫吸附试验法（ELISA）检测其血清类胰蛋白酶水平。 （3）建立小鼠急性 GVHD 模型（输注供鼠骨髓细胞+脾细胞），同时设立 对照组（输注供鼠去 T 细胞骨髓细胞）。采用 HE 染色法对小鼠肝脏、肠道、肺 组织进行病理学检查。采用免疫组织化学技术（IHC）检测两组小鼠组织类胰 蛋白酶表达情况；采用实时定量聚合酶链式反应法（real time-PCR）检测上 述组织肥大细胞胰蛋白酶-6（MCP-6，小鼠类胰蛋白酶的主要亚型）基因表达 情况，分析其表达与 aGVHD 的关系。 结果 （1）经过单因素与多因素分析，胃肠道 GVHD 危险因素包括供者类型及 预处理强度（P0.05）,肝脏 GVHD 则可能与原发疾病、预处理强度相关，皮肤 GVHD 的发生则与供者类型有关（P0.05)。 （2）胃肠道 GVHD 患者血清类胰蛋白酶水平较无胃肠道 GVHD 患者（包括 皮肤、肝脏 GVHD）增高，其差异具有统计学意义（P0.05）。 （3）小鼠 aGVHD 模型肠道、肝脏类胰蛋白酶表达水平较对照组增高，肠 道、肝脏 MCP-6 mRNA 水平在 GVHD 组较对照组增高,其差异具有统计学意义 （P0.05），而肺组织等的类胰蛋白酶蛋白及 MCP-6 mRNA 水平较对照组无明显 差异（P0.05）。 结论 预处理强度是胃肠道 GVHD 发生的危险因素，而对类胰蛋白酶水平的变 化监测可能有助于评估判断胃肠道 GVHD 的发生及病变程度；类胰蛋白酶在 aGVHD 靶器官具有一定的组织分布特点，可能对 aGVH