月季的花药培养陈玉娇一轮复习.pptVIP

花中皇后—月季又称“月月红”，自然花期5至11月 课题2 月季的花药培养 兴义八中 陈玉娇 植物的花药培养在育种上有什么意义？ 花粉粒（1N） 单倍体植株（1N） 二倍体纯合子植株（2N） 缩短了育种周期，得到的都是纯种。为新品种的培育开辟了新途径。 药隔 花药 花粉囊 囊壁 花粉粒 2、花药的结构 花丝 雄蕊 小孢子四分体 单核 双核 被子植物花粉发育过程 小孢子母细胞花粉母细胞 小孢子 减数分裂 有丝分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 有分丝裂 2精子 1个 营养细胞 生殖细胞 4个 4个 4个 4个 4个 8个 （小孢子四分体时期 单核居中期 单核靠边期 花粉粒双核期） 被子植物花粉的发育过程 4个 4个 4个 产生花粉的两种途径 单倍体植株 注：花药离体培养得到的植株不一定是单倍体。  ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎； ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难； ③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，菌少，易消毒。 （三）影响花药培养的因素 1、材料的选择： 2、培养基的组成： 3、其他因素： 激素种类和浓度配比 从花期看： 从花粉看： 从花蕾看： 月季的初花期 单核期 完全未开放的 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ （四）实验操作——材料选取 2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 方法1：醋酸洋红法(将染色体染成红色) 方法2：焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。 花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色） 花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上→焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成蓝黑色） 1、从花期看：月季的初花期 从花粉看：单核期 从花蕾看：完全未开放的 （二）材料的消毒 5、无菌水冲洗3～5次 1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） （三）接种和培养 1 灭菌后花蕾，要在 下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。 3 通常每瓶接种花药 ，温度控制在 左右， 。幼小植株形成后才 。 2 在剥离花药时，要尽量 （否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化 无菌条件 不损伤花药 去除花丝 7-10个 25℃ 不需要光照 需要光照 主要原因是花粉管核和生殖核融合造成的 四、 结果分析与评价 1、选材是否恰当 选材是否成功是花药培养成功的关键。应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。 2、无菌技术是否过关 如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。 3、接种是否成功 如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。 植物组织培养技术与花药培养技术的比较 项目 相同点 不同点 植物组织培养技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 外植体为体细胞，染色体数无需加倍。 花药培养技术 取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。 下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两 种途径，请据图回答有关问题： 课堂练习: (1)选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用　　　　期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过　　　　来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是　　　 　。 (2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中　　　 　。　　　　 (3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度　　　　的薄壁细胞，胚状体与　　　　发育形成的胚有类