胍变及脲变Α-淀粉酶的研究-色谱.PDF

第 卷第 期 色 谱 年 月 - 胍变及脲变 淀粉酶的研究 Α 用高效疏水色谱法研究变性机理和复性效率Ξ 白 泉 卫引茂 耿信笃 西北大学现代分离科学研究所 西安 提 要 用疏水性强弱不同的两种色谱柱对 盐酸胍及 脲变性的 淀粉酶变体和在疏水 Α 色谱介质表面上折叠的中间体进行了分离和复性 通过研究和比较发现 两者的变性机理和形成折叠中间体的 ∀ 个数以及复性效率均不相同 在用疏水性较弱的疏水色谱柱对脲变 淀粉酶的折叠中间体进行分离时 得到了 ∀ Α 疏水性接近连续的 数目很多的中间体 用疏水性较强的疏水色谱柱对胍变 淀粉酶进行复性的效果较好 还 ∀ Α ∀ 研究了柱温变化对其折叠分离效果和复性效率的影响∀ 关键词 高效疏水色谱法 蛋白折叠 淀粉酶 蛋白变性机理 Α 分类号 前言 实验部分 蛋白折叠是生物化学中十分活跃的研究领域∀ 主要试剂 等人用 盐酸胍和 淀粉酶 枯草杆菌 由上海生物化学所生产 Α ∀ 脲对蛋白质的变性作用进行了系统的研究 他们认 称取标准 Α 和 分别溶于 ∀ 为 在高浓度变性剂溶液中 许多蛋白质分子都是以 和 脲溶液中 使胍变 Α 高度伸展的构象存在的 到目前为止 对这两种变性 和脲变 浓度分别为 和 胍 ∀ Α ∀ 剂使蛋白变性的变性机理尚不清楚 文献 分 变