耐热木聚糖酶和葡萄糖醛酸苷酶的共表达及应用.PDF

146 2015, Vol.36, No.01 食品科学 ※生物工程 耐热木聚糖酶和葡萄糖醛酸苷酶的共表达及应用 1 1,* 1 2 3 沈艺红 ，薛业敏 ，侯静静，许家兴，李相前 （1.南京师范大学金陵女子学院，江苏 南京 210097 ；2.淮阴师范学院江苏省生物质能与酶技术重点实验室， 江苏 淮安 223000 ；3.淮阴工学院江苏省生物质转化与过程集成工程实验室，江苏 淮安 223003 ） 摘  要： Thermotoga maritima α 目的：提高海栖热袍菌（ MSB8 ）来源的木聚糖酶XynB和 -葡萄糖醛酸苷酶AguA生 产效率并降低生产成本。方法：利用基因重组技术将海栖热袍菌的XynB 和AguA 基因置于不同表达盒下构建共表达 xynB aguA xynB aguA Escherichia coli 载体pET-20b- - 和pET-28a- - ，分别转化大肠杆菌 JM109 （DE3 ）进行诱导表达， E. coli xynB aguA E. coli 获得双酶混合物进而水解桦木木聚糖及玉米芯。结果：重组菌 JM109 （DE3 ）/pET-28a- - 比 xynB aguA JM109 （DE3 ）/pET-20b- - 产酶更具优势，在LB培养基中诱导培养8 h ，XynB和AguA 的产量分别达到 7.6 U/mL和0.5 U/mL ，在TB培养基中培养，XynB可达到10.27 U/mL，AguA为1.5 U/mL。在80 ℃水解条件下，双酶 比单一木聚糖酶能够更彻底降解桦木木聚糖，所得酶解液中木二糖的含量和纯度更高；从还原糖释放量及电子显微 镜观察可以看出双酶液对农副产品玉米芯具有良好的降解作用。结论：XynB 和AguA 基因（T. maritima ）的克隆共表 达具有可行性，并且在生物转化、食品工业和饲料生产等领域具有潜在应用前景。 关键词：木聚糖酶；葡萄糖醛酸苷酶；共表达；水解 Coexpression and Application of Thermostable Xylanase and Glucuronidase 1 1,* 1 2 3 SHEN Yihong , XUE Yemin , HOU Jingjing , XU Jiaxing , LI Xiangqian (1. Ginling College, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China; 2. Jiangsu Key Laboratory for Biomass-based Energy and Enzyme Technology, Huaiyin Normal University, Huaian 223000, China; 3. Jiangsu Provincial Engineering Laboratory for