2. 实时荧光定量PCR技术应用(终版).pptxVIP

实时荧光定量PCR技术应用;荧光定量PCR整体解决方案;Real-Time PCR技术在QST领域的应用;食品安全;“食源性致病微生物”引起食品污染是食源性疾病发生的主要原因，仅由“食源性致病微生物”引发的疾病有就250种之多，在全世界造成了很多的食品安全事件。 国家卫生计生委截止2013年通过突发公共卫生事件网络直报系统，共收到全国食物中毒类突发公共卫生事件报告152起，中毒5559人，死亡109人。 微生物引起的食源性疾病，已成为我国食品安全的头号杀手，一旦发生，对公众的健康危害是明确而广泛的。 食品法典委员会(CAC)已将微生物性健康危害列为食源性危害的三大原因之一。;1. Isolate DNA ;25 g固体样品 +225 mL BPW（若需要增菌） OR 225 mL 生理盐水（若无需增菌）; MicroSEQ? 检测系列 TaqMan? 检测系列;冻干试剂的优点;目的：利用特异性TaqMan荧光定量PCR技术, 建立大肠杆菌O157∶H7快速敏感特异的检测方法。 方法：以大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因作为靶序列, 设计一对引物和探针, 优化引物和探针的浓度比和Mg2 +浓度, 以大肠杆菌O157∶H7和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性。 结论：该方法特异性强, 稳定性高, 操作简便快捷, 适应食品微生物检验发展需要, 具有较大的推广及应用价值。;;;ceeramTools ?一体化、即用型RT-PCR一步法试剂盒;;快速、准确、可靠的食源性病毒检测方案—戊型肝炎病毒检测方案;快速，准确，可靠的食源性病毒检测方案—门果病毒提取对照试剂盒;牡蛎中GⅡ型诺如病毒快速检测方法研究;食品安全;;截取一段抗病基因-接入载体质粒-转入土壤杆菌-感染植物细胞-整合到细胞染色体-生成新植株;转基因产品PCR检测特异性比较;;具体检测流程—以转基因玉米为例 SN/T1196-2012;GMO检测试剂盒;仪器平台：ABI 7500;食品安全;检测肉源性成分的重要性;从5-20 g 样品进行均质 使用核酸提取试剂盒从5-20 g 样品中抽提DNA;肉源性成分具体检测及定量流程--以马肉检测为例;2、荧光定量PCR定性检测;肉源性成分具体检测及定量流程--以马肉检测为例;1、融化马肉和动物预混液. 涡旋混匀后置于冰上。 2、在1.5 ml离心管中，为每个样品，对照或标准品分别制备2个反应： 7.5 μl 马肉预混液 12.5 μl 通用预混液 或 5 μl DNA 样品（10 ng/μl）* *对照反应中用稀释标准品或阴性对照替代 3、用光学膜封板，或光学盖盖管，瞬时离心 4、扩增： 5、分析： ;动物源性成分检测产品;物种检测;物种定量;基于TaqMan技术进行肉类鉴定方案的优点;检品：牛肉丸 仪器：ABI 7500 肉类鉴定试剂盒：RapidFinder Beef/Chicken/Pork ID Kit ;公共卫生;人兽共患病对公共卫生安全的影响及监测重要性;流感病毒通用检测流程;流感病毒核酸检测流程（Real Time-PCR）;核酸提取试剂盒 AM1836;核酸提取试剂盒 AM1836;2、荧光定量PCR 定性检测;WHO推荐使用AgPath one-step RT-PCR kit（AM1005） ;人传染病检测;生物安全检测;禽流感亚型H7N9的荧光定量PCR检测;目的：建立一种快速准确的检测埃博拉病毒（ＥＢＯＶ）亚型的方法。 方法：根据ＧｅｎＢａｎｋ中公布的ＥＢＯＶ　ＮＰ基因序列，设计引物和ＭＧＢ探针，通过优化反应条件，建立一种检测ＥＢＯＶ扎伊尔亚型和苏丹亚型的一步法ＭＧＢ荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ方法。 结论：本文将荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ技术用于埃博拉病毒的定量检测中，并且建立了ＥＢＯＶ扎伊尔亚型和苏??亚型荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测方法，具有一定的创新性。该方法的建立对加快我国ＥＢＯＶ诊断技术的研究具有重要推动作用。;动物传染病的控制;动物疫病的危害性及监测的重要性;我国方针政策;荧光定量PCR技术对动物疫病的检测策略;;猪病检测试剂盒--Taqman?蓝耳病病毒(PRRSV NA/EU);猪病检测试剂盒-- VetMAX? Gold猪流感病毒(Swine Influenza Virus)检测试剂盒;牛病检测试剂盒-- Taqman?牛病毒性腹泻病毒(BVDV);动物健康快速检测系统;基于TaqMan探针的牛布氏杆菌实时荧光定量PCR的特异性鉴定;目的: 建立二重荧光定量RT- PCR 方法, 用于禽流感病毒(