甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用-厦门大学学报自然科学版.PDF

第 47 卷 　第 3 期 ( ) Vol . 47 　No . 3 厦门大学学报 自然科学版 　2008 年 5 月 J our nal of Xiamen U niver sit y (N at ural Science) May 2008 　 甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用 郭云集 ,宋康康 ,李智聪 ,陈清西 (厦门大学 生命科学学院 ,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 ,福建 厦门 36 1005) 摘要 : 在蘑菇酪氨酸酶抑制剂的筛选实验中 ,发现甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用 ,可以导致酪氨酸酶的单 酚酶活力和二酚酶活力下降 ,实验结果表明 ,甘醇酸抑制蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力下降 50 % 的抑制剂浓度 ( I C ) 分别为 29 . 74 和 1. 80 mmol/ L . 对单酚酶活力的迟滞时间也有明显的延迟效应 ,30 mmol/ L 的甘醇酸可以使迟滞 50 时间延长了250 %. 甘醇酸对二酚酶的抑制作用是可逆过程 ,抑制类型为混合型. 通过动力学分析 ,测得甘醇酸对游离酶 ( ) ( ) E 和酶底物络合物 ES 的抑制常数分别为 0 . 72 和 5 . 05 mmol/ L ,通过研究甘醇酸对酪氨酸酶的抑制作用机理 ,为进 一步研究设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定基础. 关键词 : 酪氨酸酶 ;甘醇酸 ;抑制作用 ;动力学 中图分类号 :Q 356 . 1 　　　　文献标识码 :A 　　　　　文章编号 (2008) ( ) ( ) ( ) 　　酪氨酸酶 EC 1. 14 . 18 . 1 为具有单酚酶和二酚 L DO PA 、L 酪氨酸 Tyr 为 Al drich 化学公司产 [ 1 ] ( ) 酶活力的含铜金属酶 ,它通过将 L 酪氨酸羟化生成 品;甘醇酸 分析纯 为国药集团有限公司产品;其他试 ( ) ( L 多巴 单酚酶活力 ,再将 L 多巴氧化成多巴醌 二 剂均为国产分析纯 ;U V650 分光光度计. ) 酚酶活力 ,多巴醌通过一系列反应形成黑色素. 酪氨 1. 2 　方 　法 酸酶作为黑色素合成的关键酶 ,其异常过量表达可导 酪氨酸酶活力的测定参考文献[5 ]方法 ,单酚酶测 致人体的色素沉着性疾病. 在果蔬中是导致褐变的主 定以2 . 0 mmol/ L Tyr 为底物 ,二酚酶活力的测定以 要酶类. 昆虫表皮的酪氨酸酶产生的黑色素可以保护 0 . 5 mmol/ L L DO PA 为底物 ,在 3 mL 0 . 05 mol/ L 昆虫免受紫外线的辐射 ,酪氨酸酶也与昆虫蜕皮过程 ( ) 磷酸缓冲液 p H 6 . 8 的测活体系中 ,先加 0 . 1 mL 含 中的鞣化作用有关[2 ] . 因此 ,酪氨酸酶是昆虫赖以生存