水生无脊椎动物细胞培养-库问搜索.PDF

细胞生物学杂志ChineseJournalofCell 2006．28：173—178 Biology hnp：／／wwwcjob．org 水生无脊椎动物细胞培养 刘万磊+ (山东理工大学生命科学学院，淄博255049) 摘要 目前水生无脊椎动物的细胞培养研究远远落后于哺乳动物和昆虫的培齐研究，其培 养方法基本仍是套用哺乳动物或昆虫的细胞培养模式。尽管在几十年中进行了一些探索，而且原 代培养也取得了一些进展，但到目前为止除了淡水蜗牛胚胎BGE细胞系外，其他动物都还没有成 功的建立长时间持续传代的细胞系。现对水生无脊椎动物细胞培养的研究进行综述，并对所面临 的主要困难进行了总结，对水生无脊椎动物细胞培养的前景提出了一些看法。 关键词 水生无脊椎动物：细胞培养；原代培养；细胞系 自从上世纪初Harrison和Carrel创立动物组织和 1虾 细胞的体外培养方法以来，细胞培养技术得到了长 虾属于节肢动物门甲壳纲，是重要的经济水产 足的发展，在基础理论研究和应用研究中都起到了 养殖动物。上个世纪80年代以来，世界范围内掀 不可替代的重要作用。然而，到目前为止，对于 起了养虾高潮，并且发展迅速，到上世纪末时产量 细胞培养技术本身的研究主要集中于脊椎动物(特别 仅次于鱼类，年产值几十亿美元flJ。但虾养殖业受 是哺乳动物)和昆虫，对于水生无脊椎动物细胞培养 到各类疾病特别是病毒的巨大威胁，一些疾病曾经 的关注却相对较少。在公开刊物发表的有关细胞培 导致中国大陆、台湾省、菲律宾等国家和地区的虾 养问题的论文中，绝大多数是脊椎动物和昆虫的； 养殖业基本崩溃…1。细胞培养技术是研究病毒学的 基础，可用于病毒的分离、纯化、疫茁和单克隆 目前世界上几个主要的细胞库ATCC、ECACC、 的制备以及病毒敏感药物的筛选，这种方法在哺乳 RCB所收集的细胞系只有一例来自于淡水蜗牛；2004 动物病毒性疾病的研究和治疗上已非常普遍。 年3月在美国旧金山召开了第十一届国际无脊椎动物 在过去的几十年中，很多研究团体和个人致力 细胞与组织培养大会，大会讨论的主题仍然是昆虫 于建立持续的虾细胞系，但均未获得成功。但是。 的细胞培养问题(http：／／www．sivb．org／InVitroReport／38． 在摸索虾细胞原代培养的条件方面积累了一些经 3／SciNews．htm)。 验，这些研究为虾细胞系的建立打下了基础。而 从20世纪60年代开始，少数研究团体和个人开 且，在细胞培养的基础上分离病毒和病理的研究也 始关注水生无脊椎动物的细胞培养河题。半个世纪以 取得了初步的成功。 来，研究者一直致力于建立长时间持续传代的细胞 1．1虾细胞的培养方法 系。遗憾的是，付出的努力大多以失败告终。到目 1．1．1 培养基 目前在虾细胞培养中主要还是采 前为止，除了淡水蜗牛胚胎(Biomphalariaglabrata 用改良的哺乳动物或昆