说明书-Magen美基生物.DOC

美基生物 – 生物样品前处理专家 【产品名称】 通用名：核酸提取或纯化试剂 产品编号：IVD3301-50 【包装规格】 50份/盒 【预期用途】 本试剂盒适用于从10~250μl的血液、血清、血浆、牛奶、唾液、或其它体液样品中提取高纯度的总DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，整个提取过程只需30分钟。试剂盒对全血或液体样品直接裂解和消化，因而纯化的DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA，病毒DNA(如乙肝)，或其它寄生微生物的DNA。得到的DNA可直接用于PCR, Southern Blot, 病毒DNA检测等实验。 【检验原理】 HiPure硅胶柱是采用高结合力的玻璃纤维滤膜为基质。滤膜在高浓度离子化剂(如盐酸胍或异硫氰酸胍)条件下，可通过氢键和静电吸附核酸，而蛋白质或其它杂质不被吸附而去除。吸附了核酸的滤膜经洗涤去除蛋白质和盐，最后可以用低盐缓冲液(如Buffer AE)或水，洗脱出滤膜上吸附的核酸。得到的核酸纯度高，可直接用于各种下游实验。 血液或其它体液样品在裂解液AL和蛋白酶K作用下裂解消化，DNA释放到裂解液中。加入乙醇后，转移至柱子中过滤，DNA被吸附上柱子的膜上，而蛋白质则不被吸附而随滤液流出去除。柱子经Buffer DW1洗涤蛋白质和其它杂质， 经Buffer DW2洗涤去除盐分，最后DNA被低盐缓冲液(Buffer AE)洗脱。洗脱的DNA可直接用于PCR、Southern blot、病毒检测等实验。 核酸提取或纯化试剂 备案号：粤穗械【样本要求】 样本的采集、运输及保存符合相关操作规范。 枸橼酸钠或EDTA抗凝血从采血时开始计算，在2-8oC条件下可保存5天。抗凝血液、血浆、血清在-20oC条件下保存1个月以上。避免反复冻融。 处理凝固血液时，需用匀浆器进行充分匀浆，充分液化后再操作。 【试剂盒组份】 产品编号 IVD3301-50 主要成分 HiPure gDNA Mini Columns 50 含玻璃纤维的聚丙烯管 2ml Collection Tubes 100 聚丙烯管 Buffer AL 20 ml 盐酸胍、表面活性剂 Buffer DW1 30 ml 盐酸胍、异丙醇 Buffer DW2* 20 ml HYPERLINK /knows/%E4%B8%89%E7%BE%9F%E7%94%B2%E5%9F%BA%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E7%94%B2%E7%83%B7 \o \t _blank 三羟甲基氨基甲烷 Proteinase K 30 mg 蛋白酶 Protease Dissolve Buffer 2 ml HYPERLINK /knows/%E4%B8%89%E7%BE%9F%E7%94%B2%E5%9F%BA%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E7%94%B2%E7%83%B7 \o \t _blank 三羟甲基氨基甲烷、甘油 Buffer AE 30 ml HYPERLINK /knows/%E4%B8%89%E7%BE%9F%E7%94%B2%E5%9F%BA%E6%B0%A8%E5%9F%BA%E7%94%B2%E7%83%B7 \o \t _blank 三羟甲基氨基甲烷 说明书 1 【储存条件及有效期】 本试剂盒在除Proteinase K外，其它组份可以在室温(15~25℃)下贮存。Proteinase K干粉室温下运输，收到产品后需保存于2~8℃或-20℃。Proteinase K溶解后，需保存于-20℃。按上述条件保存时，本试剂盒有效期为12个月。 【准备工作】 无水乙醇(96-100%) 70℃水浴锅 溶解Proteinase K (20mg/ml): 加入1.5ml Protease Dissolve Buffer至Proteinase K干粉中，轻轻颠倒让蛋白酶K充分溶解。溶解的Proteinase K须保存于-20℃。 Buffer DW2使用前，须按瓶子标签所示，加入无水乙醇进行稀释。 【DNA抽提流程】 在1.5ml或2.0ml离心管中，加入25μl Proteinase K。 转移10~250μl抗凝血液，血清，血浆，牛奶，唾液或其它液体样品至装有蛋白酶K的离心管中。振荡5秒混匀。若样品体积250μl，则用Buffer PBS或Buffer AE调整总体积至250μl。 需去除RNA，加入2μl RNase Solution混匀，室温静置10分钟。 加250μl Buffer AL至样品中。颠倒3~5次，高速涡旋混匀20秒。70oC水浴1