基于功能寡核苷酸探针的疾病相关物检测新方法的研究-分析化学专业论文.docx

万方数据 万方数据 学 校 代 号 ： 10532 学 号： B1111S026 密 级： 湖南大学博士学位论文 基于功能寡核苷酸探针的疾病 相关物检测新方法的研究 学 位 申 请 人 姓 名 ： 邱丽萍 导 师 姓 名 及 职 称 ： 俞汝勤 教授 谭 蔚 泓 教 授 培 养 单 位： 化 学 化 工 学 院 专 业 名 称： 分 析 化 学 研 究 方 向： 化 学 与 生 物 传 感 器 论 文 提 交 日 期 ： 2014 年 8 月 论 文 答 辩 日 期 ： 2014 年 9 月 答 辩 委 员 会 主 席 ： 吴海龙 教授 万方数据 万方数据 Functional Oligonucleotide Probe-based Biosensors for Disease-related Species Detection by QIU Liping B.S. (Hunan University) 2009 A dissertation submitted in partial satisfaction of the requirements for the degree of Doctor of Science in Analytical Chemistry in the Graduate School of Hunan University Supervisors Professor Yu Ruqin and Professor Tan Weihong September, 2014 万方数据 万方数据 PAGE VI PAGE VI 万方数据 湖 南 大 学 学位论文原创性声明 本人 郑重 声明 ：所 呈 交的 论文 是本 人在 导 师的 指导 下独 立进 行 研究 所取 得的 研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均 已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学 位论 文作 者完 全 了解 学校 有关 保留 、 使用 学位 论文 的规 定 ，同 意学 校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本 人 授 权 湖 南 大 学 可 以 将 本 学 位 论 文 的 全 部 或 部 分 内 容 编 入 有 关 数 据 库 进 行 检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于 1、保密□，在______年解密后适用本授权书。 2、不保密□。 （请在以上相应方框内打“√”） 作者签名： 日期： 年 月 日 导师签名： 日期： 年 月 日 I 博士学位论文 博士学位论文 基于功能寡核苷酸探针疾病相关物检测新方法的研究 基于功能寡核苷酸探针疾病相关物检测新方法的研究 摘 要 20世纪60年代，DNA双螺旋结构模型的提出使生命科学的研究进入了分子层 面，并催生了核酸杂交技术。该技术发展迅猛，已被广泛应用于分子生物学、分 子遗传学和生物医学等领域，而核酸探针的研发是影响其应用与发展的关键。其 中，寡核苷酸探针由于具有序列较短、设计简单、人工合成效率高、响应速度快、 选择性好等优点，备受广大科研工作者的关注。然而，常规一比一的信号响应模 式在一定程度上限制了寡核苷酸探针的灵敏度。如何提高寡核苷酸探针的分析性 能，仍是科研工作者亟待解决的问题。 随 着 新 型 体 外 筛 选 技 术 —— 指 数 富 集 的 配 基 系 统 进 化 技 术 （ Systematic evolution of ligands by exponential enrichment, SELEX）的创立，多种功能寡核苷酸 被筛选出来，突破了传统的基于核酸杂交技术建立的核酸研究与应用的范畴，极 大地拓展了寡核苷酸探针在生物技术、医学诊断与治疗、细胞生物学、微生物学 和化学等领域的应用。核酸适配体是其中一个典型的例子。核酸适配体是指通过 SELEX技术筛选出来的能够与目标物特异性结合的寡核苷酸序列。该目标物可以 是各种小分子、多肽、蛋白质，甚至是整个细胞、细菌或病毒。当与目标物特异 性结合时，核酸适配体将折叠成特定的三级构型。通过利用核酸适配体构象的改 变并结合适当的信号转换机制，多种核酸适配体传感器被研发。尽管如此，关于 核酸适配体的研究和应用仍处于起步阶段。除了核酸适配体外，脱氧核酶也是通 过SELEX技术筛选出来的功能寡核苷酸序列。脱氧核酶 是指在特定的条件下（结 合了特定的金属离子或者小分子），具有催化活性的寡核苷酸序列。基于脱氧核糖 对金属离子的特异性识别，多种用于金属离子检测