钾离子通道调节剂高通量筛选技术平台建立及先导化合物筛选-药理学专业论文.docxVIP

中 中 文 摘 要 PAGE 10 PAGE 10 (V1/2) 从给药前的-22.0 ± 1.4 mV 左移至-80.7±2.9 mV。（8）10 μM QO-058 能够显著增强大鼠背根神经元中的 M 电流，其作用强度与 10 μM 瑞替加 滨相当，可引起通道电流增大 25%。（9）100 μM QO-58 可以引起 KCNQ1/KCNE1 通道电流增大 1 倍。 结论：（1）电生理膜片钳技术确证 KCNQ2/3 通道和 KCNQ4 通道靶 点高通量筛选结果。（2）化合物 QO-28 对 KCNQ1 钾通道电流和 Kir2.3 钾通道电流具有先增加后抑制作用。（3）化合物 QO-58 呈剂量依赖性增 大 KCNQ2/Q3 通道和 KCNQ4 通道电流，其 EC50 值分别为 2.30±0.86 μM 和 0.60±0.09 μM。（4）化合物 QO-58 呈剂量依赖性使 KCNQ2/3 和 KCNQ4 通道电压依赖性激活向超极化方向移动。（5）化合物 QO-58 能够增大大 鼠背根神经元中的 M 电流。（6）化合物 QO-58 能够增大 KCNQ1/KCNE1 通道电流。 总 结 1.成功建立起稳定表达 Kir2.3 钾通道 HEK293 细胞株。 2.成功建立以 KCNQ2/3 通道为靶点的高通量筛选平台，并完成近 150 种 化合物的筛选，筛选出能够开放 KCNQ2/3 通道作用的三个系列具有创新 性结构的，近 38 个化合物具有开放 KCNQ2/3 通道的作用，其中 26 个化 合物是首次合成。 3.成功建立以 KCNQ4 通道为靶点的高通量筛选平台，完成对近 100 种化 合物的筛选，筛选出 14 个具有开放 KCNQ4 通道作用的化合物，与开放 KCNQ2/3 通道的化合物相同。 4.成功建立以 Kir2.3 通道为靶点的高通量筛选平台，并发现 QO-28 和 QO-58 对 Kir2.3 通道作用为低浓度抑制高浓度开放。 5.电生理膜片钳技术确证 KCNQ2/3 通道和 KCNQ4 通道靶点高通量筛选 结果。 6.化合物 QO-28 对 KCNQ1 钾通道电流和 Kir2.3 钾通道电流具有先增加后 抑制作用。 7.化合物 QO-58 呈剂量依赖性增大 KCNQ2/Q3 通道和 KCNQ4 通道电流， 其 EC50 值分别为 2.30±0.86 μM 和 0.60±0.09 μM。 8.化合物 QO-58 呈剂量依赖性使 KCNQ2/3 和 KCNQ4 通道电压依赖性激 活向超极化方向移动。 9.化合物 QO-58 能够增大大鼠背根神经元中的 M 电流。 10.化合物 QO-58 能够增大 KCNQ1/KCNE1 通道电流。 关键词：KCNQ 钾通道；Kir2.3 钾通道；膜片钳；高通量筛选；原子 吸收 Rb+离子流出 英 英 文 摘 要 Establishment of high-throughput screening technique for potassium channel modulators and identification of active compounds ABSTRACT Mutation of KCNQ channels has been implicated in a range of inherited disease. Up to now, five members of KCNQ potassium channels, KCNQ1-5, have described. KCNQ1 and KCNE1 are associated to form the slow delayed rectifier potassium channels (IKs). Mutations in either KCNQ1 or KCNE1 genes produce a type of hereditary QT interval prolongation syndrome (LQT1), and also related to the formation of deafness. Heteromeric KCNQ2 and KCNQ3 channels have been proved to underlie the SCG neuronal M-current. The dysfunction of M channel is closely associated with benign neonatal familial convulsions (BFNCs), Alzheimer, epilepsy, etc. KCNQ2/3 channel opener retigabine