间充质干细胞（MSCs）对神经胶质瘤趋化能力研究-临床医学专业论文.docxVIP

南开大学医学院硕士毕业论文 南开大学医学院硕士毕业论文 摘要 摘 要 目的：本实验以立体定向技术建立C6大鼠胶质瘤模型：分离培养并建立稳定增 殖的人脐血间充质干细胞(MSCs)株系，利用流式细胞技术鉴定其表面抗原， 诱导分化证明其分化潜能；应用免疫组织化学方法观察MSCs对胶质瘤组织的趋 化能力及分布规律，为以MSCs为细胞载体的靶向治疗提供实验依据。 方法：从健康足月新生儿脐血中分离出间充质干细胞加以培养，以多种抗体标 记其表面抗原，用流式细胞仪检测，并行体外诱导分化实验，确定所获细胞是 间充质干细胞。借助立体定向仪在大鼠脑组织内定点注射C6大鼠胶质瘤细胞， 建立胶质瘤模型。模型建立七天后，再次在立体定向仪的指示下，在模型鼠脑 组织中输注预先用BrdU标记的人间充质干细胞。按注入位置分为原位组、同 侧半球组和同侧脑室组。六至八天后，处死大鼠，灌注固定后取脑。进一步制 作成石蜡切片，以苏木素伊红(H．E．)染色确定胶质瘤组织的范围。相邻切片 采用免疫组织化学方法(ABC法)显示标有BrdU的MSCs，观察其在胶质瘤 组织和周围正常脑组织中的分布规律。 结果二 1大鼠胶质瘤模型成功建立，H．E．染色下胶质瘤组织与周围正常脑组织分 界清楚。 2原位组、同侧半球组和同侧脑室组均可见MSCs在胶质瘤组织中广泛分 布，而在周围正常脑组织中很少见。特别是在胶质瘤组织与正常组织交界处， 这一定向分布更为明显。 小结： 在大鼠胶质瘤模型中，人间充质干细胞对胶质瘤组织表现出明显趋化性， 能从远处向胶质瘤组织迁移并定位于其中。显示MSCs可作为一种潜在的细胞 载体用于神经胶质瘤的靶向治疗。上述结果尚未见到国内外相关报道。 关键词：问充质干缨胞(MSCs)；神经胶质瘤：趋化性 南开大学医学院硕士毕业论文 南开大学医学院硕士毕业论文 Abstract objectives：To isolate、cultivate and identiry human umbilical cord blood Mesenchymal Stem Cells(MSCs)．By immunohistochemical methods to investigate the tropism and distribution of MSCs in C6 mtracramal gliomas，which is established by stereotactical procedure．This is the basic research for future clinical ofthe migratory feature ofMSCs． Methods：Mesenchymal stem cells，which were isolated from human umbilical cord blood were cultivated in vitro．Then we identify these cells by FACS with multi—antibodies．And the cultivated cells were induced to differentiate into multiple mesenchymal cell types(osteocyte and adipose cell)under experimental conditions． Both of these measures testify they MSCs．SD rats received stereotaetically guided injections of C6 glioma cells into the given areR of forebrain day 0．On day 7，MSCs，which were co-cultivated、Ⅳim BrdU 48-72 hours before，were injected stereotactically into the tumor bed、the distant intracranial site in the same hemisphere ipsilateral cerebral lateral ventricle(the coordinates specified below)． Animal models were killed day 13-1 5．After the process ofpcrfualon fixa