粪便检查(wang)课件.pptVIP

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  (2)霍乱弧菌初筛:用米泔样粪便悬滴检查和涂片染色进行初筛检查,可疑的再进一步做血清学检查、培养与鉴定。 2.病毒检查:粪便中常见的病毒有轮状病毒(rotavirus)和肠病毒(adenovirus),可引起腹泻、呕吐、发热等,尤其是婴幼儿发病率较高,往往引起特发性流行。检查方法有ELISA、胶乳凝集等。 五、粪便检查研究进展 1、使用DiaSys FE-2粪便沉渣分析站 近几年来,临床上开始使用粪便工作站代替传统的湿片显微镜法来检查粪便中的细胞、寄生虫卵等有形成分。粪便工作站系统包括标本浓缩收集管、自动加样装置、流动计数室、带摄像内置数码位相差显微镜和微电脑控制台等组成。 工作程序: 1、粪便离心管的混合室内加入2%甲醛盐水2.7ml,再加入乙酸乙酯0.8ml; 2、加入新鲜粪便一匙(约1g)于混合室中,封闭混合室;接上10ml的离心管,尖端朝上,旋转或摇晃使其乳化; 3、拧紧粪便离心管的盖子,以RCF 1000g速度离心1min;去掉混合室和过滤环; 4、除去脂肪物质并倒掉沉渣上面的液体;余下的粪沉渣形态放大镜检 粪便处理流程图: 粪沉渣 3.5ml 混合 加入试剂 分层 吸样 吸取沉渣染色 摄像显微镜 计算软件输入 带图报告 该系统具有以下特点:①阳性率高:标本浓缩收集管能对粪便进行浓集和过滤处理。避免粪便粗渣观察视野的影响,镜下视野十分清晰,阳性率大大提高。②操作简易、速度快捷:只需按提示按钮,工作站将在10s内完成自动吸样、自动染色、定量标本输送进行分析,自动冲洗全过程,减少测试时间,提高工作效率和可重复测定。 ③定量检测:具有标本染色和不染色双通道流动计数室,每次测定定量自动吸取粪便浓缩物15μl,其中10μl通过未染色通道进入计数室,另外5μl粪便浓缩物和5μl染色液进入染色计数室,增加分析量,提高阳性检出率。④自动稀释:对粘稠度高的粪便浓缩物,可作稀释,解决高浓度标本计数和观察难的问题。 ⑤高安全性封闭系统,防止污染:标本前处理是在粪便浓缩离心管内经过甲醛杀菌、乙酸乙酯乳化的无害化处理,达到无臭无污染。处理后标本分析全过程均在封闭系统内进行,避免粪便标本对操作人员和环境污染。⑥成本低:每次检查完后可自动清洗管道及双流动计数室,无须消耗品。⑦自动化程度高:工作站与显微镜系统、电脑、打印机组合,可储存检查结果,并打印出报告单。 传统方法与新方法比较 传统盐水涂片法 FE-2工作站分析法   生理盐水涂片法虽简便易行,但漏检率极高,每次涂片的标本量少,约几十毫克   留取标本量远多于盐水涂片法(1克左右),粪便之中的病理成分最大限度的浓缩,所以大大提高了阳性检出率   粪便标本对操作者和环境有污染,直接接触粪便和粪臭常令操作者不愿主动承担此项目工作   整个实验在封闭的管道中进行,标本经处理后无粪臭味,大大的增加了安全性;无其它异味,整个检验过程轻松   无图像保存   带图报告单更加直观,有利于医生与病人的理解 2.新的染色方法用于粪便的检查 三原染色法(trichrome)是用三原染色液(主要成分为品红、石炭酸及孔雀绿)对粪便进行染色,经固定液固定、酒精脱色和二甲苯中透明,涂片可永久保存。该法能检查除隐孢子虫以外的肠道原虫。此方法简便,染液可重复使用,染色后肠道原虫形态完好,被认为是对粪便肠道原虫形态学快速鉴别诊断最新最理想的方法;改良抗酸染色法用于粪便染色,隐孢子虫的包囊形态易辨认,效果好,使之与粪便中的酵母菌相区别,具有操作简便、快速、准确等特点,可用于隐孢子虫的诊断。 3.免疫学方法和技术用于粪便微生物的检查 现代粪便检查引入了免疫学方法和技术,已开展了胶乳凝聚试验、ELISA检查粪便中轮状病毒、肠病毒、阿米巴原虫和血吸虫等。用酶联免疫法检查粪便原虫的循环抗原以及用于相关寄生虫病的诊断(如阿米巴原虫、蓝氏贾第鞭毛虫、华支睾吸虫),克服了由于形态不典型和方法学的问题所致的检出率低的缺点,对寄生虫感染的早期诊断、感染度及疗效观察和预后判断具有重要价值。 4.分子生物学方法和技术用于粪便微生物感染的检查 PCR技术可检查便中蓝氏贾第鞭毛虫、弓形虫、锥形虫、腺病毒、轮状病毒以及各种致病性细菌的感染,具有简便、快速、特异性强、灵敏度及检出率高等特点,应用越来越广泛;20世纪80年代以来,人们从寄生虫表型特征(抗原、酶)的检测,发展到对病原体遗传物质(核酸)的检测。由于遗传物质不受病原体生长周期及环境等因素的影响,大大地提高了检测的特异性、灵敏度和阳性率。目前核酸探针技术已用于锥形虫病、血吸虫病和阿米巴病的诊断,对寄生虫的研究已向纵深方向发展。 5、消化道出血新的标记物用于粪便隐血试验 粪便中的红细胞或血

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