89K基因的敲除及其对毒力的影响.PDF

Research Paper 研究报告 微生物学报 A cta M icrobiolog ica Sinica 53 (3 ) :276 － 283 ; 4 March 20 13 ISSN 000 1 － 6209 ; CN 11 － 1995 / Q http :/ / journals． im ． ac ． cn / actamicrocn 高致病性 2 型 猪链 球 菌 IV 型 样 分 泌 系统 virB1 -89K 基因的 敲 除及其对毒 力的影响 * ， ， ， ， ， ， ， ， 钟秋 李 明 赵岩 陈恬 殷素鹏 王敏 饶贤才 谭银玲 胡福泉 ， 400038 第 三军 医大学基础 部微生物学教研室 重庆 : 【 】 2 IV virB 1 -89 K ， 摘要 目 的 构 建 高 致 病 性 型 猪 链 球 菌 型 样 分 泌 系 统 基 因 的 敲 除 株 和 互 补 株 研 究 virB 1 -89 K 。 【 】 virB 1 -89 K ， PCR 基 因 缺 失 对 细 菌 毒 力 的影 响 方 法 通 过 同 源 重 组 技 术 敲 除 基 因 多 重 筛 。 virB 1 -89 K pSET 1 virB 1 -89 K ， 选 敲 除 株 并 测 序 鉴 定 再 将 基 因 克 隆 到 穿 梭 质 粒 后 转 入 敲 除 株 中 构 建 。 0 5 ZY H3 3 、 virB 1 -89 K CvirB 1 -89 K 互 补 株 比 较野 生 株 突 变 株 △ 和 互 补 株 三 者 基 本 生 物 学 特 性 的 差 ， virB 1 -89 K 。 【 】 virB 1 -89 K 异 小 鼠 实 验 分 析 基 因 敲 除 后 对 细 菌 毒 力 的 影 响 结 果 成 功 构 建 突 变 株 △ 和 CvirB 1 -89 K ， ， 30 % ， 互 补 株 在 基 本 生 物 学 性 状 无 明 显 改 变 的情 况 下 敲 除 株 的 毒 性 降 低 到 野 生 株 的 互 。 【 】virB 1 -89 K 2 0 5 ZY H3 3 IV 补 株 可 恢 复 其 毒 性 结 论 基 因 作 为 型