甲状腺素对大鼠解偶联蛋白-2基因表达的影响-儿科学专业论文.docxVIP

华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 硕士学位论文 甲状腺素对大鼠解偶联蛋白．2 基因表达的影响 研究生： 伊迎春 导 师： 林汉华教授 摘 要 目的 通过检测大鼠骨骼肌组织(skeletonmuscle SM)、肝组织(1iver LV)和白色脂肪‘组织(white adipose tissue WAT)中解偶联蛋白一2 (uncoupling protein一2 UCP2)在不同甲状腺功能状态下基因表达的变化， 探讨甲状腺素对UCP2基因表达的影响。 方法 1、动物模型的建立：正常雄性Wistar大鼠30只，随机分为3 组，对照组、甲状腺功能亢进(甲亢)组和甲状腺功能低下(甲低)组， 每组10只，甲亢组和甲低组分别应用左旋甲状腺素钠片330 p g／kg／d和 甲巯眯唑片25mg／kg／d溶解于2mL生理盐水中灌胃，共10天，造成大鼠 甲亢和甲低状态。在预定时间处死大鼠，从心脏取血2ml，分离血清；取 腓肠肌组织(SM)、肝组织(LV)和附睾旁WAT约100rag，冷藏备用。2、 用放射免疫法检测血清总T3、T4的浓度，确定模型是否成功。3、用TRIzol 等试剂提取组织中总RNA，测定总RNA的浓度。4、逆转录聚合酶链式 反应(RT—PCR)法对UCP2 mRNA进行扩增，产物经1．5％琼脂糖凝胶电 泳后，应用凝胶成像分析系统成像并检测各电泳条带光密度，结果以 UCP2／B—actin光密度比值表示。 结果 1、甲亢组大鼠的血清总T”T4明显高于对照组，两组之间差 别有显著性(P0．05)；甲低组血清总T3、T4明显低于对照组，差异有显 著性(P0．05)，说明各动物模型均符合实验要求。2、RT．PCR产物经琼 脂糖凝胶电泳后，各组均有202bp和552bp两条条带，与UCP2和B．actin 华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 硕士学位论文 的电泳理论扩增片段长度相吻合。3、电泳结果，与对照组相比，甲亢组 大鼠sM、LV和WAT中UCP2 mRNA的水平分别增加了65％、50％和40 ％，甲低组大鼠SM、Lv和WAT中UCP2mRNA的水平分别下降9％、24 ％和20％，差别均具有显著意义，P0．05。 结论 生理水平的甲状腺素是UCP2的表达所必需的，过量甲状腺紊 对大鼠SM、Lv和WAT中UCP2基因的表达具有上调作用，甲状腺素水平 过低则下调大鼠SM、Lv和WAT中UCP2基因的表达。 关键词 甲状腺素解偶联蛋白．2基因表达RT—PCR电泳 2 兰!型堡盔堂旦塑墨堂堕 兰!型堡盔堂旦塑墨堂堕 堡主堂垡丝奎 Effect of Thyroid Hormone on Gene Expression of Uncoupling Protein-2 in Rats Po stgraduate：Yi Yingchun Tutor：Lin hanhua Abstract Objective：Through detecting the change of gene expression of uncoupling protein一2(ucP2)in rats skeleton muscle(SM)、liver(LV)and white adipose tissue (WAT) in different thyroidfunction situations．To investigate the effect of thyroid hormone on the gene expression of the UCP2． Methods：1．Creation of the animal model：Thirty normal male Wistar rats were divided into three groups at random：control group，hyperthyroid group and hypothyroid group，ten rats each group．The hyperthyroid or hypothyroid status of rats were made by administration of L-Thyroxine or methimazole for ten days，the dose of the L—Thyroxine was 330 u g／kg／d，the dose of the methimazole