和耐药性相关的细菌的酶(修改).pptVIP

与耐药性相关的细菌的酶 陶冬梅 耐药机制 1灭活酶或钝化酶. 2.抗生素的渗透障碍 3.靶位的改变 4.其它：拮抗物 细菌在环境中产生多种酶，与细菌的致病性、侵袭力、耐药性等有关。 β－内酰胺酶 钝化酶 乙酰转移酶 酯化酶 β－内酰胺酶  β－内酰胺酶是一群酶，已知就有170种以上，是细菌对β－内酰胺类抗生素耐药主要作用机制。 β内酰胺酶通过其作用位点Ser-OH对β内酰胺环上的羧基碳发生亲核攻击使环打开，形成由酯键连接的酰酶复合物中间体，然后迅速水解酰酶中间体的酯键使酶再生，释放已失活的β内酰胺部分， 细菌因此产生耐药性，其水解效率是细菌耐药性的主要决定因子。 β－内酰胺酶 较常用的是根据一种Ambler分类法分成 A、B、C、D四类， 另一常用的是Bush功能分类法。主要的酶有头孢菌素酶、青霉素酶、广谱酶、超广谱酶、金属酶等。 G＋球菌产生β－内酰胺酶一直较少发生进化， G－杆菌主要产生超广谱β－内酰胺酶（ESBLs），尤以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌多见。 另一类重要的头孢菌素酶为几乎所有的肠杆菌科（除了沙门菌属和克雷伯菌属的某些种）和铜绿假单胞菌产生，称为AmpC酶。自然状态下细菌产生此酶的量很少，但某些细菌如阴沟肠杆菌、弗氏枸橼酸杆菌等在β－内酰胺类抗生素的作用下可大量诱导产生，导致细菌对除碳青酶希类之外的所有β－内酰胺类抗生素耐药。 钝化酶分类 氨基糖苷类钝化酶，是质粒介导，由G－菌及部分G＋菌产生，已知的钝化酶有三类：乙酰转移酶，核苷转移酶，磷酸转移酶。 氯霉素乙酰转移酶 灭活氯霉素 红霉素酶和其他灭活酶 超光谱β－内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析 室内质量控制： 阴性质控：ATCC 25922 不产ESBL的标准菌株大肠埃希菌， 阳性质控： ATCC 700603 产头孢噻肟型ESBL的标准菌株肺炎克雷伯菌。 超光谱β－内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析 执行标准： 根据NCCLS对抗菌药物敏感性试验K-B法. 表型确证试验 本实验室采用Oxoid药敏纸片 头孢他啶，头孢他啶∕棒酸； 头孢噻肟，头孢噻肟∕棒酸 现将2007年以来本实验室对临床送检标本培养出的136例大肠埃希菌、102例克雷伯菌属的ESBLs表型确定结果分别进行统计 。 超光谱β－内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析 表1 136 例 大 肠 埃 希 菌 ESBLs 表 型 确 定 结 果 统 计 表 标本类型 总例数 产ESBLs酶例数 ESBLs 阳 性 率 血液 18 6 0.33 尿液 67 5 0.07 痰 51 24 0.4 合计 136 35 0.26 结果显示，血培养标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占33%；尿液标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占7%；痰标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占47% 超光谱β－内酰胺酶（ESBLs）的检测结果分析 表2 35 例 大 肠 埃 希 菌 ESBLs 阳 性 表 型 确 定 结 果 统 计 表 标本类型 头孢他啶型 头孢噻肟型 ESBLs 阳 性 率 头孢他啶型 头孢噻肟型 血液 2 *