真核生物基因表控.pptVIP

基因调控的反式转录因子 三、mRNA的可变剪接： 1．概念： mRNA前体按不同方式剪接，可产生两种或多种mRNA，称可变剪接（alternative spling） 2．? 可变剪接方式： 多个 启动子 多个加尾位点 选用不同的剪接方式 例子 ： 前B淋巴细胞，RNA终止于外显子M2，外显子M1和M2编码C端疏水区。合成的抗体重链C端有疏水区，疏水区嵌在膜中，把抗体固定在质膜上 抗原刺激前淋巴细胞，被膜上的抗体所识别，引起细胞的分化与增殖 分泌阶段，RNA在外显子μ4后终止，活化的B淋巴细胞产生的抗体其重链C端没有疏水区，被分泌到细胞外。 感染真核细胞的病毒DNA，大多具有可被寄主细胞蛋白质激活的增强子。 小鼠乳腺瘤病毒（MMTV）的DNA，具有糖皮质激素基因的增强子。在能被类固醇激活的细胞（如乳腺上皮细胞）中，MMTV病毒能旺盛生长。 病毒有寄主范围，因它有组织特异和物种特异的增强子。 启动子和增强子的典型模式： 启动子含能结合转录因子的分散分布的短序列元件（10bp），分布在转录起始位点上游约200bp的范围内 增强子可与启动子之间相距几个kb，含几个紧密排列的能结合转录因子的序列元件 DNA可能通过卷曲或重排，使结合到启动子和增强子的转录因子之间相互作用，形成一个大的蛋白质复合体 增强子 增强子的主要作用机制：增加启动子附近转录激活因子的浓度 如左图： 增强子和启动子位于线性DNA两端时，增强子不对启动子起作用；但当DNA被蛋白质连接成环形时起作用 增强子和启动子位于两个分开的环形DNA分子上时，不存在相互作用；但当两个DNA环成连环时，能相互作用 绝缘子（insulator）:能阻断激活或失活效应通过的元件。它们有一种或同时有两种主要特征： 当绝缘子位于增强子和启动子之间的时候，它能阻断增强子对启动子的激活作用 当绝缘子位于活性基因和异染色质之间时，能保护活性基因免受异染色质延伸所带来的失活效应 绝缘子的作用是增强基因调控的准确性 沉默子(silencer)：负性调节元件，起阻遏作用 3、应答元件(response element )： 一组受共同调控的基因，各基因都有一个相同的序列元件，该元件是诱导型转录因子识别靶基因的位点。 如：热休克应答元件（HSE）、血清应答元件（SRE）、糖皮质激素应答元件（GRE） cAMP - 蛋白激酶Ａ途径 组成 胞外信息分子，受体，G蛋白，腺苷酸环化酶 (adenylate cyclase，AC)， cAMP，蛋白激酶 A(protein kinase A，PKA) cAMP的作用机理 PKA的激活 R 调节亚基 C 催化亚基 目 录 R R （cAMP-dependent protein kinase，PKA） R： 调节亚基 C： 催化亚基 cAMP 蛋白激酶A Ｃ Ｃ PKA的作用 1） 对物质代谢的调节作用 通过对效应蛋白的磷酸化作用，实现其调节功能。 磷酸化酶激酶ｂ 磷酸化酶激酶b ATP 磷酸化酶ｂ 磷酸化酶ａ ATP PPi 磷蛋白磷酸酶 磷蛋白磷酸酶 H2O PPi ? ? ? PKA 抑制物Ｉa 抑制物Ｉb ATP 磷蛋白磷酸酶 PPi 肾上腺素对糖原代谢的影响 肾上腺素 ＋受体 肾上腺素 · 受体复合物 激活Ｇ蛋白 激活AC ATP cAMP PKA ? 目 录 受cAMP调控的基因中，在其转录调控区有一共同的DNA序列(TGACGTCA)，称为cAMP应答元件(cAMP response element , CRE)。 可与cAMP应答元件结合蛋白 (cAMP response element bound protein,CREB)相互作用而调节此基因的转录。 (2) 对基因表达的调节作用 Gs AC ATP cAMP C C R R C C 蛋 白 磷 酸 化 R R 2cAMP 2cAMP CREB N Pi Pi Pi 转录活化域 DNA结合域 细胞膜 核 膜 热休克基因：当温度升高时，某些基因被关闭，而热休克基因则被表达。该基因在原核与真核生物中各不相同。 细菌中，是合成一个新的σ因子，它指导RNA聚合酶核心酶识别热休克基因所共有的一个与普通启动子不同的-10序列； 真核生物中: 热休克基因有一个共同的共有序列（HSE） 由一个独立的转录因子HSTF所识别 此因子的活化使特异的一组（约20个）含HSE的基因启动转录。 金属硫蛋白基因（MT）-单一基因受多个应答元件调控： MT蛋白能与重金属结合，将其排出胞外，使细胞免受重金属的损伤 TRE：增强子元件，能和转录因子AP1相互作用，介导对TPA（一种致癌物）的应答 MRE：启动子元件，金属诱导应答