角膜碱烧伤后新生淋巴管的实验与临床研究-眼科学专业论文.docxVIP

中山大学硕士论文 中山大学硕士论文 角膜碱烧伤后新生淋巴菅的实验与临床研究 伤后新生淋巴管的发生情况和临床上的一些间接估测指标。 第一部分：角膜碱烧伤后新生淋巴管的实验研究 目的研究大鼠角膜碱烧伤后的角膜新生淋巴管的动态变化。 方法制备大鼠角膜碱烧伤模型，并记录烧伤后每天的炎症指数(inflammation index，ID)变化；采用5’核苷酸酶一碱性磷酸酶(5’一n￡kse—Alkaline phosphatase，5’-NA-ALP)Xff．重酶组织化学染色及大鼠淋巴管内皮特异性抗体 LYVE一1免疫组织化学染色定量检测碱烧伤后6h、ld、3d、1w、2w、3w、4w、 5w的角膜新生淋巴管和血管的动态变化，并进行淋巴管计数(1ymphatic vessels counting，LVc)和血管的计数(blood vessels counting，BVC)；同时，采用常规的 HE染色检测各个时间点的多形核白细胞的浸润情况，并计数PMN值；采用透 射电镜和全角膜免疫组化定性观察各个时间段的淋巴管的局部微观结构和整体 情况。 结果大鼠角膜碱烧伤后早期就有新生淋巴管生成，2w末时LVC达到高峰 f7．67士1．oo)，以后逐渐下降，5w末时LVC基本消失，为O．3310．50。碱烧伤引 起的炎症高峰在3d时出现，比新生淋巴管高峰早且无明显的相关性“=O．36， P=O．341)。新生血管的达到高峰的时间与淋巴管一致，两者有很好的相关。K(r= O．982，PO．001)。 结论大鼠角膜碱烧伤后早期就有新生淋巴管生成并随时间动态变化，且其变化 可能与炎症和新生血管有关。 第二部分：角膜碱烧伤后新生淋巴管的临床研究 目的探讨人角膜碱烧伤后新生淋巴管的发生情况 方法22例角膜碱烧伤后需行角膜移植的患者纳入本研究，根据病史记录每个 患者的碱烧伤程度(injured degree，ID)和碱烧伤的时间(time，T)，并详细观 测术前患者的烧伤眼的炎症指数(inflammation index，II)，及采用计算面积 软件SCION，根据患者术前的裂隙灯照片，计算出患眼角膜新生血管的相对面 积(blood vessel S area，BVA)。采用5’核苷酸酶一碱性磷酸酶(5’-nase．AlkNine phosphatase．5’_NA—ALP)N(重酶组织化学染色及人淋巴管内皮特异性抗体 LYVE。1和管腔内皮非特异受体CD3l免疫组织化学染色定量检测角膜新生淋 巴管数目(LVC)和血管数目(Bvc)；同时，采用常规的HE染色检测各个烧伤角 II 中山大学硕士论文 中山大学硕士论文 角膜碱烧伤后新生淋巴管的实验与临床研究 膜的多形核白细胞的浸润情况，并计数PMN值；采用透射电镜定性观察淋巴 管的局部微观结构。 结果双重酶组织化学染色和免疫组化染色定量检测22例碱烧伤病人中7例有 新生淋巴管(约占32％)，检测到的所有淋巴管腔数目(LVC=60)占所有的管腔数 目(LVC+BVC一378)的16％，7例有新生淋巴管的患者均有角膜碱烧伤时间 T64M(months)。所有病例都伴随有新生血管(BVC、BVA)和炎症细胞的浸润 (PMN)，且它们及患者角膜碱烧伤程度(ID)、碱烧伤时间(T)、炎症指数(II)均与 新生淋巴管(LVC)有不同程度的相关性(均有P0．05)。通过逐步回归(stepwise) 的方法可得到回归方程Y=1．134XI+O．083X2(AJUSTED R2=O．814，Y-LI，XI=II， x：=BVA)。透射电镜观察碱烧伤角膜组织中存在微观特征为管腔相对较大，管 壁为单层内皮细胞覆盖，内无红细胞的淋巴管。 结论一定比例的碱烧伤后人角膜中有新生淋巴管出现，新生淋巴管的变化与 多个因素有相关性，但主要通过临床指标炎症指数和新生血管面积的观测就能 够估计其发生情况。 【关键词】角膜；碱烧伤；新生淋巴管；角膜移植；抗淋巴管治疗 ⅡI 中山大学硕士论文 中山大学硕士论文 角膜碱烧伤后新生淋巴管的实验与临床研究 Experimental and clinical research of lymphangiogenesis in alkali burned corneas Major：Ophthalmology M．D candidate：Lin Haotian Supervisor：Prof．Liu Zuguo Abstract Part I：Experimental research of lymphangiogenesis in rat alkafi burned corneas PURPOSE To study the development ofcomea[1y phangiogenesis after c