角膜溃疡修复材料生物羊膜的生物安全评价研究-卫生毒理学专业论文.docxVIP

山东大学硕士学位论文结果：(1)热原实验中，3只家兔的体温升高均低于0．6℃，且3只家兔的升温总和 山东大学硕士学位论文 结果：(1)热原实验中，3只家兔的体温升高均低于0．6℃，且3只家兔的升温总和 低于1．4℃，可以认为生物羊膜没有致热性。(2)在急性毒性试验中，注射后立即观察昆 明鼠，没有出现不良反应，在注射后4、24、48、72h继续观察试验组和对照组昆明鼠的 一般状态、毒性表现和死亡动物数，以及72h后的动物体重，结果表明试验组动物症状 和体重的变化都在可接受的范围之内，可以认为生物羊膜无急性全身毒性作用。(3)溶 血试验中阳性对照管中观察到溶血现象，试验品和阴性对照管中未见溶血现象。移入比 色皿内测吸光度，得到试验组溶血率为0．7％，5％，结果表明，生物羊膜没有引起溶 血反应。(4)皮内刺激试验中，皮内刺激反应指数为0．0，表明该试验品无刺激作用。(5) 体外细胞毒性试验中，显微镜下观察可见阳性对照呈现明显的细胞毒性，空白及阴性对 照细胞形态正常，试验组观察到有极轻的毒性。定量测试结果表明，试验品毒性为1级， 空白对照为0级，而阳性对照为4级。定量测试和定性测试的结果均表明，生物羊膜具 有极轻的细胞毒性。(6)潜在皮肤致敏试验中，SC组和CSO组的致敏反应情况相同， 二者的试验组和阴性对照组的红斑和水肿记分等级均为0，而阳性对照组的红斑和水肿 记分等级均≥1。所以在本项试验条件下，生物羊膜无潜在皮肤致敏性。(7)AMES试验 中，各个菌株的阴阳性的自发回变菌落数均按预期生长，阴性对照在各自的范围内，阳 性对照回变菌落数均至少为阴性的2倍以上，试验样品回变菌落数与阴性对照基本无差 异。计算被测样品菌落计数平均值与阴性对照菌落计数平均值的比值均介于0．5和2之 间，表示菌株生长未受抑制，且受试品对各受试菌株无诱导作用。因此，本研究中试验 品提取液对各试验菌株没有诱导性，不具有致突变作用。(8)微核试验中，各组PCEs 占红细胞总数的比值的差别均无统计学意义，计算各组MPCEs在PCEs中所占的数量， 阳性对照的雌雄两组与样品组(SC)的雌雄两组的差别均有统计学意义，与样品组(CSO) 的雌雄两组的差别也均有统计学意义，阴性对照(SC和CSO)与样品组(SC和CSO) 的差别均无统计学意义。本次试验结果表明，试验组没有出现细胞毒性的迹象，可以认 为被测样品浸提液不会对小鼠产生遗传毒性。(9)精子畸形试验中，试验组小鼠精子畸 形发生率与阴性对照组比较差异无显著性(胗O．05)，而CP阳性对照组与阴性对照组比较 有显著差异(氏0．05)。结果表明在本次研究的条件下，被测样品浸提液并未表现出对小 鼠产生遗传毒性的迹象。(10)亚慢性毒性试验中，在整个试验期间，试验组和对照组对 比，大鼠的一般行为、体重增长、进食、尿常规、血液学、血生化、脏器重量及病理检 查均未见显著性差异胗0．05)。在本次研究条件下，我们认为生物羊膜植入皮下组织92 2 山东大学硕士学位论文天后，没有导致毒性效应的特异性变化，不会引起亚慢性毒性。 山东大学硕士学位论文 天后，没有导致毒性效应的特异性变化，不会引起亚慢性毒性。 结论：生物羊膜在本研究的试验条件下，无致热性，不会引起急性全身毒性反应和 溶血反应，无皮内刺激反应，具有轻微的细胞毒性，对皮肤无潜在致敏性，无致突变作 用，无遗传毒性，无亚慢性毒性，因此，可以认为生物羊膜具有较高的生物安全性。关 于生物羊膜在医疗器械领域的开发应用尚在起步阶段，尚未见有类似的针对生物羊膜的 生物安全性的全面评价的报道，因此本研究为生物羊膜的在医疗领域的开发应用提供了 可靠的安全性数据。 关键词：角膜溃疡修复，生物羊膜，生物安全性，评价 山东大学硕士学位论文BIOTIC 山东大学硕士学位论文 BIOTIC SAFETY EVALUATIoN oF BIoLOGICAL AMNION THE CoRNEA ULCER RENoVALTE M【ATERIAL Major：Toxicology Master．Candidate：SUN Li-l(ui Advisor：XIE Ke—qin，Professor Abstract objectives To evaluate the biotic safety of biological amnion by pyrogen test，acute toxicity test，hemolysis test，intradermally stimulus test，cell toxicity test in vitro，potential skin sensitization test，reverse mutation test，chromosome aberration test，tera