胶原肽的制备及其促进成骨细胞增殖分化活性研究-农业推广专业论文.docxVIP

II II III III 结果显示，随酶解时间延长，水解度提高，相对分子质量降低，H5、H8、 H22 相对分子质量小于 1000Da 的组分分别占 94.73%、95.56%、97.58%， 平均相对分子质量分别为 351.39Da、324.67Da、253.06Da。同时，H5、H8、 H22 的氨基酸组成较接近，符合典型水产胶原蛋白的氨基酸组成，但也有 一定的差异，脯氨酸的含量逐渐降低，羟脯氨酸含量增多。 将 H8 先采用截留分子量为 800-1000Da 纳滤膜进行分级，收集渗透液 1（Permeate1，P1）和截留液 1（Retentate1，R1），比较两者活性强弱；将 活性强的组分用截留分子量为 400-600Da 纳滤膜进行分级，收集渗透液 2 （Permeate2，P2）和截留液 2（Retentate2，R2），比较两者活性强弱。结 果表明与 R1 相比，P 1 促进成骨细胞增殖分化活性较强，细胞增殖率和分 化促进率分别达 126.92%和 131.77%。R2 与 P2 对成骨细胞增殖分化均有一 定的促进作用，但 P2 活性更强，细胞增殖率和分化促进率分别达 130.48% 和 120.72%，均达到了 Hc 的活性水平。 对 R2、P2 的相对分子质量分布和氨基酸组成进行分析。结果显示，两 者存在较大差异。P2 相对分子质量小于 1000Da 的组分占 98.65%，平均相 对分子质量为 184.62Da；R2 相对分子质量小于 1000Da 的组分占 96.14%， 平均相对分子质量为 319.59Da。氨基酸组成方面，P2 中甘氨酸和丙氨酸共 占 67.2%，其余氨基酸中只有脯氨酸含量超过 5%，达到 6.1%，另外胶原蛋 白的特征氨基酸羟赖氨酸含量增加了 125%；R2 中除脯氨酸含量增加了 30%、羟赖氨酸增加 100%外，其他均与 H8 接近。胶原肽促进成骨细胞增 殖分化的活性或许跟这两种氨基酸，或含有这两种氨基酸的多肽有关。 P2 活性虽然最高，但得率极低。而 P1 与 R2 活性差异不大，考虑成本 问题，选择 P1 作为最终精制肽。根据整个工艺制备出的胶原多肽色泽均匀、 粉末细腻，溶解性好，达到 SB/T 10634-2011《淡水鱼胶原蛋白肽粉》对一 级产品的质量要求，胶原粗肽得率为 18.20%，精制肽得率为 6.67%。 关键词：罗非鱼 胶原肽 活性 成骨细胞 增殖 分化 PAGE PAGE VI PAGE PAGE VII THE PREPARATION OF COLLAGEN PEPTIDES AND ITS STIMULATIVE EFFECTS ON PROLIFERATION AND DIFFERENTIATION OF OSTEOBLAST ABSTRACT Collagen is an important part of the organic matrix of bone. Its hydrolysate, collagen peptides, have a lot of physiological activity, such as promote the absorption of amino acids and protein synthesis, and promote mineral absorption, anti-osteoporosis, lowering blood pressure, anti-oxidation, etc. In this paper, we use tilapia skins , which is one of the by-products of tilapia, as raw materials for preparing the collagen peptide to exploring the effect of collagen peptides on promoting osteoblast proliferation. And after preparation and differentiation activity to obtain collagen peptide products with specific efficacy, and to make tilapia by-products more valuable. The tilapia skins’ main compositions were determined in this article. Protein content in dry skin reached 90.30%, and 66.90% of which ar