胶质芽孢杆菌对含钾硅酸盐矿物风化作用的分子机制研究-生物；微生物学专业论文.docxVIP

南京师范大学学位论文胶质芽孢杆菌对含钾硅酸盐矿物风化的分子机制研究 南京师范大学学位论文 胶质芽孢杆菌对含钾硅酸盐矿物风化的分子机制研究 I I 摘 要 本文开展了胶质芽孢杆菌对几种含钾硅酸盐矿物风化作用过程与分子机制 方面的研究。 荚膜物质是胶质芽孢杆菌的重要附属物，该菌的许多有益特性都与其产生的 肥厚荚膜有密切的联系，并且荚膜在该菌对矿物进行风化时起重要作用。细菌荚 膜在含不同阳离子浓度的培养基中培养，荚膜染色的变化情况说明细菌对钾离子 等所需的阳离子能够进行主动吸收，而这一过程能够进一步促进钾离子等阳离子 从矿物颗粒的晶格中释放出来；作者据此提出荚膜离子通道假想。 将胶质芽孢杆菌放置在有氮或无氮培养基中培养，检测其荚膜多糖含量的变 化。分别将菌株接入含有不同矿粉（黑云母、钾长石）的培养基中培养，检测其 在有氮、无氮培养基中荚膜多糖含量的变化，并在以钾长石和黑云母为矿源的情 况下，比较研究了菌株在有氮、无氮培养基中对矿物的风化能力，通过一系列的 实验，证实胶质芽孢杆菌在生长过程中所分泌的粘稠胞外聚糖可帮助细菌有效黏 附在矿物表面，形成细菌-矿物复合体，并改变及维持该复合体内部的微环境， 有助于该菌的解钾作用，而且细菌分泌的胞外蛋白质（或酶）在该菌对含钾硅酸 盐矿物的解钾作用过程中发挥重要作用； 将胶质芽孢杆菌接入以钾长石和黑云母为矿源的有氮、无氮培养基中培养， 检测到该菌碳酸酐酶活性的变化，并进行批量发酵后小分子酸性分泌产物的提 取、分离、纯化与鉴定等方面的研究，结果表明，该菌可产生 2-羟基苯甲酸，4- 羟基苯乙酸，4-羟基苯甲酸甲酯等小分子物质。说明胶质芽孢杆菌在有硅酸盐矿 物存在的时候，会刺激其自身分泌出一些有机小分子物质来降解硅酸盐矿物。 蛋白质组学初步研究结果表明：当有矿粉存在时，不仅可以诱导胶质芽孢杆 菌产生更多的胞外蛋白，而且会刺激细菌产生大量的胞内蛋白，推测胶质芽孢杆 菌在矿物存在条件下会刺激细菌产生大量的胞外蛋白，这些蛋白可能会直接作用 矿物，进行化学降解，但这些蛋白究竟是哪类蛋白，其具体的生物功能还有待进 一步的探索；结合胞内蛋白的双向电泳的实验结果分析，推测这些受刺激产生的 大量胞内蛋白有可能会编码能够降解矿物的酶或小分子酸性物质，并与矿物的分 解直接相关。 目前，国内外对胶质芽孢杆菌对硅酸盐矿物分解作用研究还处于初步阶段, 有关该菌与硅酸盐矿物的相互作用过程和机理方面的问题仍然是一个十分薄弱 的研究领域，为此，深入开展这方面的研究工作具有十分重要的学术价值。 关键词：胶质芽孢杆菌；硅酸盐矿物；风化；分子机制；多糖；蛋白质 Abstract This paper presents a study of the effect of Bacillus mucilaginosus on the weathering of K-bearing silicate minerals and the molecular mechanism during this process. As a key adjunct structure for the bacteria, the capsular polysaccharides are related to the strain’s many beneficial characteristics and help to speed the weathering process of silicate minerals. We cultivated Bacillus mucilaginosus KO2 in medium containing different concentration of positive ion and carried out the Congo red stain for the bacterial capsule. Using an optical microscope, we could observe the strain and find that the bacteria can adsorb the metal cation from the environment and this process can accelerate metal positive ion releasing from crystal lattice of the mine grain. So, we supposed that there is possibly a positive ion channal existed in the capsular layer. For further understanding the effect of t