基因修饰的脐血MSCs移植对帕金森病大鼠旋转行为-现代仪器与医疗.PDF

临床研究 2015年  第21卷   第3期 基因修饰的脐血MSCs移植对帕金森病大鼠 旋转行为研究 樊志刚　王东 （河南医学高等专科学校，郑州　451191 ） [ 摘　要 ]　背景 ：目前临床治疗帕金森病以药物为主，细胞移植治疗逐渐成为一种趋势，基因修饰过 的脐血干细胞能否改善症状鲜见报道。目的：观察TH 修饰的HUMSCs 移植对帕金森病大鼠旋转行为 的影响。方法：将酶切鉴定后的新构建质粒pEGFP-C2-TH 经电穿孔法转染培养第4 代HUMSCs ，注 射到PD 大鼠模型右侧脑室，观察大鼠行为学变化，移植细胞在大鼠脑组织内的迁移。结果与结论： 质粒pEGFP-C2-TH 转染HUMSCs 移植后8 周，细胞逐渐向脑室转移，PD 大鼠症状显著改善(P ＜0.05 ）， 移植细胞可以在PD 大鼠脑内存活。TH 修饰的大鼠HUMSCs 经脑室移植对PD 大鼠具有明显治疗作用， 为临床中干细胞移植的应用提供实验依据。 [ 关键词 ]　基因治疗；脐血来源间充质干细胞；帕金森病；大鼠；酪氨酸羟化酶 中图分类号：R394　文献标识码: A　文章编号：2095-5200（2015）03-030-05 DOI：10.11876/mimt201503011 帕金森病(Parkinsondisease ，PD) 的病因尚未明 脐血是胎儿出生时脐带内和胎盘近胎儿一侧血 确，与遗传在内的多种因素有关[1] 。其病理特征为黑 管内的血液。脐血中含有丰富的造血干细胞和间充质 质致密部的色素脱失和多巴胺神经元的大量死亡[2] 。 [17] ，是近几 干细胞（mesenchymal stem cells.MSCs ） 好发于中老年人，平均始发年龄为57 岁，60 岁以 年来发现的一类具有与骨髓干细胞相同的多向分化 上患病率达 1% ～2% 。目前，据统计，世界上约有 潜能的原始祖细胞，并且来源丰富，免疫排斥低。酪 [3] [4] 500 万名帕金森病患者 ，其中170 万在中国 。随 氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase ，TH) 是儿茶酚胺类 [5] 着人口老龄化，患病率和发病率呈明显的增长趋势 。 神经递质即多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素生物合 虽然近年来药物治疗[6] 方面的研究使帕金森病症状 成过程所需的限速酶，也是DA 能神经元的标志酶， 得到有效控制，但仍有许多问题亟待解决，比如：药 它以四氢生物喋呤啶(BH4) 为辅酶，催化酪氨酸的 物不良反应、药效降低、痴呆、平衡障碍等，如何 羟化而生成多巴(DOPA)。 进行个性化治疗[7] 给现有药物治疗提出了巨大挑战。 本实验将大鼠酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxy- 帕金森病的外科治疗主要包括苍白球损毁术、脑深部 lase ，TH) 基因修饰的人脐血来源间充质干细 电刺激等，应用受限于手术的适应证、手术技术的高 (Humanumbilical cord blood -derived mesenchymal stem 要求、并发症的高风险[8] 、昂贵的医疗价格等。 cell ，HUMSCs) 立体定向注射到PD 大鼠脑室内，观 目前，细胞治疗成为新方向，主要是将各种多 察经TH 修饰后的HUMSCs 在大鼠脑内的存活、迁 巴胺能细胞移植入纹状体，多年来人们尝试各种细胞 移情况，以及移植后对帕金森大鼠旋转行为影响，为 作为种子细胞进行研究。干细胞移植和基因治疗为帕 进一步实验和临床移植途径选择提供实验依据。 金森病[9-11] 临床治疗开拓了广阔前景，P