金翘热毒清颗粒的抗炎作用研究-药剂学专业论文.docxVIP

硕士学位论文l 硕士学位论文 l 5．69．kg-1，1 1．79．kg-1)和注射用美罗培南组(0．02 g．kg-1)：采用小鼠腹腔注射 感染菌液建立小鼠腹膜炎模型，末次给药后连续观察7天，记录动物的死亡数 量，并计算死亡率。评价金翘热毒清颗粒对感染小鼠的保护作用。 4体外采用四氮唑蓝MTT比色法检测金翘热毒清颗粒对A549细胞代谢活 力的影响。A549细胞种植密度为5x103／孑L，金翘热毒清颗粒浓度(30、20、15、 lO、7．5、5．0、0 mg／m1)，作用时间为3d，每组3个复孔。 5筛选出用脂多糖LPS激活A549细胞作为体外炎症模型，所需的LPS作用 浓度和作用时间。 5．1 A549细胞种植密度为5x103／?L，LPS浓度(500、200、100、10、1、0pg／m1)， 作用时间24h，每组3个复孔，收集细胞上清，选用双夹心ELISA法测定TNF．a 含量，确定LPS作用浓度。 5．2A549细胞种植密度为5×103／孔，200 Pg ml LPS作用时间(24、12、6、 3、1、Oh)，每组3个复孔，收集细胞上清，选用双夹心ELISA法测定TNF。a 含量，确定LPS作用时间。 6采用LPS刺激A549细胞，体外观察金翘热毒清颗粒以不同给药方式(细 胞外直接灭活组、给药治疗组)对A549细胞代谢活力的保护作用。A549细胞 种植密度为5x103／孑L，LPS刺激细胞24h，金翘热毒清颗粒浓度(7．5mg／m1)作 用时间24h，每组3个复孔。 7采用LPS刺激A549细胞活化作为体外炎症模型，观察金翘热毒清颗粒体 外不同作用时间对A549细胞分泌炎症因子TNF一伐的影响。A549细胞种植密度 为5×103／孑L，200}tg／ml LPS作用时间24h，7．5mg／ml金翘热毒清颗粒(治疗给 药方式)，作用时间(24、12、6、3、0h)，每组3个复孔，收集细胞上清，选 用双夹心ELISA法测定TNF．0【含量。 8采用LPS刺激A549细胞活化作为体外炎症模型，观察金翘热毒清颗粒体 外不同给药方式对A549细胞分泌炎症因子TNF．c￡的影响。A549细胞种植密度 为5×103／孑L，200 pg／ml LPS作用时间24h，按金翘热毒清药物以不同给药方式 (细胞外直接灭活组、给药治疗组)作用，作用时间24h，每组3个复孔，收集 TTT 万方数据 摘要细胞上清，选用双夹心ELISA法测定TNF．0【含量。 摘要 细胞上清，选用双夹心ELISA法测定TNF．0【含量。 研究结果 1．二甲苯致小鼠耳肿胀的实验结果显示，模型对照组、金翘热毒清颗粒组的 耳肿胀度分别是18．5+3．2，14．8土2．3，与模型对照组相比，金翘热毒清颗粒能使 二甲苯诱导的耳肿胀度明显降低，差异具有统计学意义(P0．05)。 2．冰醋酸诱导小鼠毛细血管通透性增高的结果显示，模型对照组、金翘热毒 清颗粒组OD值分别是0．677士0．121，0．537士0．065，与模型对照组比较，金翘热 毒清颗粒组有降低冰醋酸诱导小鼠毛细血管通透性增高的作用，差异具有统计 学意义(Po．01)。 3观察金翘热毒清颗粒对革兰氏阴性菌流感嗜血杆菌的标准株和临床株感 染小鼠的体内抗菌作用 3．1流感嗜血杆菌的标准株和临床株的MLD预试验结果范围为 106～107CFI，／抽I，。 3．2流感嗜血杆菌的标准株感染小鼠实验结果表明，模型对照组、金翘热毒 清颗粒组(20．89．k91，15．69．kg。1)的死亡率分别为100％、65％、80％，与模型 对照组相比，金翘热毒清颗粒组(20．89．kg-1，15．69．kg。1)可以降低感染小鼠的 死亡数，差异有统计学意义(PO．01或P0．05)。 3．3流感嗜血杆菌的临床株感染小鼠实验结果表明，模型对照组、金翘热毒 清颗粒组(20．89．kg-1，15．69．kg。1)的死亡率分别为100％、70％、80％，与感染 菌液不给药组相比，金翘热毒清颗粒高、中剂量组可以降低感染小鼠的死亡率， 差异有统计学意义(P0．01或P0．05)。 4 MTT法检测金翘热毒清药物对A549细胞代谢活力的实验结果显示，control 组、金翘热毒清颗粒组(5．0、7．5、10、15、20、30 mg／m1)的细胞存活率分别 为100％、94．77％、94．02％、80．18％、58．18％、48．24％、12．33％。与control组 相比，金翘热毒清颗粒组(5．0、7．5mg／m1)的细胞存活率没有明显的变化，差 异无统计学意义(PO．05或P0．01)。 IV 万方数据 硕士学位论文5体外用LPS激活A549细胞作为体外炎症模型的实验结果显示： 硕士学位论文 5体外用LPS激活A549细胞作为体外炎症模型的实验结果显