金雀异黄酮促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的分子机理探讨-药理学专业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 摘要 摘要 第一部分p44，_12MAPK，p38MAPK在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 中发挥不同功能 目的： 观察p44／42MAPK、p38MAPK通路在维生素C(Vi t C)、 B一磷酸甘油(0一GP)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞 分化过程中的作用。 方法：用[3H卜甲基胸腺嘧啶掺入率法反映细胞增殖情况；测定 碱性磷酸酶活性与钙沉积量反映细胞向成骨细胞分化状态；用 Western—blotting法反映MAPK的表达情况。 结果：与溶剂对照组相比，在促成骨细胞分化剂Vit C、B—GP 作用下，骨髓间充质干细胞(BMSCs)p44／42MAPK、p38MAPK通路均 提前5天激活。p44／42MAPK通路阻断剂(PD98059)明显减少[3H]_ 甲基胸腺嘧啶掺入率，抑制BMSCs的增殖；而p38MAPK通路的阻断剂 (SB203580)则显著降低ALP活性及钙沉积量，抑制BMSCs向成骨细 胞的分化。 结论：44／42MAPK通路在BMSCs的增殖过程中起重要作用，而 pZSMA[，K通路可能与BMSCs向成骨细胞分化调节有关。 关键词 骨髓间充质干细胞，增殖，成骨细胞分 化，p44／42MAPK，p38MAPK 第二部分植物雌激素金雀异黄酮(Cenistein)通过p38MAPK途径促 进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 目的：观察P38MAPK途径在金雀异黄酮促进骨髓间充质干细胞向 成骨细胞分化过程中的作用 方法：同第一部分。 结果：Genistein(iO 10’6 m)剂量依赖性增强骨髓间充质干细 胞(BMSCs)ALP活性、钙沉积量，促进BMSCs向成骨细胞的分化，这 一效应可被luMSB203580阻断。在BMSCs培养的第5天加入 Oenistein(101 M)可引起p38MAPK通路持续、快速的激活(可被 SB203580阻断)，同时抑制p44／42MAPK的激活(PD98059进一步减弱 其活化)。 摘要结论：p38MAPK通路在Genistein促进BMSCs向成骨细胞分化过 摘要 结论：p38MAPK通路在Genistein促进BMSCs向成骨细胞分化过 程中起重要作用。 关键词 骨髓间充质干细胞，Genistein，成骨细胞分化 p38MAPK，p44／42MAPK 硕士学位论文 硕士学位论文 摘要 ABSTRACT Part I．1344142 and p38 MAPKs exert funcfional differences in osteoblastic differentiation of mouse bone marrow—derived mesenchymal stem cell cultures Objective：To investigate the roles of p44／42 and p38MAPK signaling cascades BMSCs differentiation into osteoblasts induced by VitC and 3-GP Met}10ds：The cell proliferation was measured by【jH】．thymidine incorporation．Measuring alkaline phosphatase activity(ALP)and calcium deposition assessed the osteoblastic differentiation in BMS；Cs cultures．The MAPK signaling activity was detected by Western blowing． Results：As compared with contr01．Westem blowing analysis showed that the differentiation media(Vit C and 3-GP、resulted in 5 days earlier activation in both p44／42MAPK and p38MAPK pathways．Vit C and 13-GP dramatically increased[’H】_thymidine incorporation and proliferation，and induced ALP