金纳米颗粒大小和覆盖率对GOD结构和生物活性影响研究-物理化学专业论文.docxVIP

华东师范大学硕士学位论文摘要 华东师范大学硕士学位论文 摘要 通过物理和化学吸附，蛋白质吸附到纳米颗粒表面形成异质体。异质体的应 用范围比较广，包括生物传感器、影像学、催化、医疗、蛋白质结构和功能的研 究等。纳米颗粒表面的拓扑结构，例如：表面曲率、粗糙度、特定几何形状等， 能影响蛋白质的特定结构，进而影响到它的生物活性。在异质体的研究中，常用 的纳米颗粒有：金纳米颗粒(AuNPs)、银纳米颗粒(AgNPs)、亲水性和疏水性 的二氧化硅纳米颗粒(SNPs)等；常用的蛋白质有溶菌酶、细胞色素C、牛血 清白蛋白和真菌蛋白酶等分子量小的单聚体蛋白质。纳米颗粒对分子量比较大的 二聚体蛋白质的结构和生物活性的影响，文献上报道的较少。 葡萄糖氧化酶(GOD)是一种分子量较大的二聚体蛋白质。在食品、饲料、 医药、生物传感器等方面具有重要的应用价值。1904年，人们便发现了GOD， 其结构和生物功能已经比较清楚，GOD常被用作模型蛋白质来进行科学研究。 本文主要研究了“裸露的AuNPs大小和覆盖率对GOD结构和生物活性的 影响。利用种子生长法合成了不同大小的AuNPs，探究了还原剂的强弱对AuNPs 单分散性的影响。在覆盖率为80％的情况下，探究了不同大小的AuNPs对GOD 结构和活性的影响。此外，还探究了覆盖率对GOD活性的影响。 主要结论如下： (1)利用种子生长法，还原性弱的盐酸羟胺作为还原剂合成的AuNPs单分 散性明显优于还原性强的抗坏血酸合成的；利用种子生长法合成不同大小的 AuNPs，要防止二次成核；半峰宽能用于比较同种方法合成的AuNPs单分散性 的优劣，不能用于不同方法合成的AuNPs单分散性的比较。 (2)当覆盖率是80％时，“裸露的AuNPs的大小能强烈地影响GOD的 二级结构和其活性中心黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)所处的微环境，进而影响到 它的生物活性。13 nln AuNPs导致了GOD的Q螺旋含量减少；随着AuNPs粒 径增大，其(It螺旋含量增加；随着AuNPs粒径减小，GOD分子的色氨酸残基向 更加极性的环境移动，FAD微环境受到的扰动增大，对于52 nm和76 nm的 I 华东师范大学硕士学位论文 华东师范大学硕士学位论文 AuNPs来说，上述改变是相近的；13 nmAuNPs使GOD活性降低，随着AuNPs 粒径增大，GOD活性增强；随着覆盖率增大，GOD活性降低。 关键词：种子生长法；AuNPs；GoD；二级结构；a螺旋结构；FAD；覆盖率 Ⅱ 华东师范大学硕士学位论文Abstract 华东师范大学硕士学位论文 Abstract ne protein adsorption on nanoparticles(NPs)forms the protcin-nanoparticles bioeonjugates by physical and chemical processes．The attachment of NPs to proteins has found applications in biosensor,in imaging，in catalysis，in delivery and in the study of protein structure and function．nle protein structure call be affected by the topological structures of nanopartieles，such as，surface curvature，surface roughness， surface morphology．Tllis can lead to the changes of protein activity．Common nanoparticles include AuNPs，AgNPs and hydrophilic or hydrophobie silica nanoparticles(SNPs)，etc．And common proteins are small including Lysozyme, Cytochrome C，Bovine Serum Albumin(asA)and Fungal Protease,etc．However,a dimeric and large protein as model protein is rarely rcported． Glucose oxidase(GOD)as a dimeric and large protein,is widely used in food，f．eed， medicine and biosensor．GOD found in 1904 was used as t