第三章：酶工程动植物相细胞培养产酶.pptVIP

植物、动物、微生物细胞的特性比较 2.培养基特点 ①需要大量无机盐 ②需多种维生素和激素 ③氮源一般为无机氮 ④一般以蔗糖为碳源 应用最广的是MS培养基和LS培养基 MS培养基是1962年为烟草细胞培养而设计的培养基。LS培养基是在其基础上演变而来的。P82表3-3 ②植物细胞获取 直接分离法 愈伤组织诱导法 原生质体再生法 ③细胞悬浮培养：转新培养基，在生物反应器中进行培养 ④分离纯化：生化技术 3.工艺控制 ⑴工艺流程 种质细胞 （体细胞；杂交瘤细胞） 分散成悬浮细胞 细胞悬浮或贴壁培养 收集 分离纯化 产物 4.产酶实例 以人黑色素瘤细胞培养生产组织纤溶酶原激活剂为例 纤溶酶原 纤溶酶 ①种质细胞用胰蛋白酶处理，分散，pH7.4磷酸盐洗涤。稀释成细胞悬浮液 ②接种到反应器中，与37℃ CO2培养箱中，长成致密单层 ③去培养液，用pH7.4磷酸盐冲洗细胞 ④换无血清Eagle培养液，继续培养 ⑤每3-4天，取出培养液分离纯化 ⑥再加新鲜Eagle培养液，继续培养 ⑦亲和层析进行分离