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蛋白质综合实验 蛋白质浓度测定介绍　 　　 四种古老的经典方法: 定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。 新的测定法: 考马斯亮蓝法（Bradford法）。 还有近来广为应用的蛋白定量方法——BCA法。 在选择方法时应考虑 ①实验对测定所要求的灵敏度和精确度； ②蛋白质的性质； ③溶液中存在的干扰物质； ④测定所要花费的时间。 紫外吸收法  较为灵敏； 快速；5～10分钟； 原理：蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基在 280nm处的光吸收. 干扰物质：各种嘌吟和嘧啶；各种核苷酸 说明：用于层析柱流出液的检测；不消耗样品，测定后样品仍能回收利用. BCA（2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠）法 原理： 在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。两分子的BCA(在BCA反应液中）螯合一个Cu1+ ，形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性。优点：灵敏度非常高; 较快速40分钟内； 干扰物质：螯合剂；略高浓度的还原剂 说明：抗干扰能力强， 蛋白不可逆的变性 蛋白质含量的测定 （Lowry法） 实验目的 1.学习和掌握蛋白质含量测定的原理 2.掌握Folin-酚法（Lowry法）测定蛋白质浓度的操作技术 原理 蛋白质含