拟南芥质体定位的叶酰谷氨酸合成酶基因在低氮条件下-生物技术进展.PDF

生物技术进展 ２０１７年　 第７卷　 第１期　 ３０~３７ 研究论文 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　 ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１ Ａｒｔｉｃｌｅｓ 拟南芥质体定位的叶酰谷氨酸合成酶基因在低氮条件下的 功能分析 １ ２ １∗ １ 许博思 ꎬ　 孟红岩 ꎬ　 张春义 ꎬ　 姜　 凌 １.中国农业科学院生物技术研究所ꎬ北京 １０００８１ꎻ ２.福建省亚热带植物研究所ꎬ福建 厦门３６１００６ 摘　 要: 叶酰聚谷氨酸合成酶(ｆｏｌｙｌｐｏｌｙｇｌｕｔａｍａｔｅ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅꎬＦＰＧＳ)在细胞的不同位置负责将多个谷氨酸残基逐个加在 单谷氨酸四氢叶酸(ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅꎬＴＨＦ)的γ￣羧基上ꎬ从而形成有活性的多尾形式四氢叶酸ꎮ ＡｔＤＦＢ是定位在质体中 的ＦＰＧＳꎬ利用ＡｔＤＦＢ 基因的Ｔ￣ＤＮＡ插入突变体Ａｔｄｆｂ￣３ꎬ通过比较野生型拟南芥及突变体在不同氮源条件下的生长状态 以了解ＡｔＤＦＢ 基因的生物学功能ꎮ 结果表明ꎬ低氮条件下ＡｔＤＦＢ 基因功能的缺失导致Ａｔｄｆｂ￣３ 突变体主根的急剧缩短ꎬ 叶酸含量的明显下降ꎻ而在Ａｔｄｆｂ￣３ 突变体中过表达ＡｔＤＦＢ 基因后ꎬ在低氮条件下的表型恢复至野生型拟南芥水平ꎬ并且 叶酸含量有所提高ꎮ 综上所述ꎬＡｔＤＦＢ 基因在拟南芥叶酸合成代谢途径中发挥着重要作用ꎬ可能影响低氮环境下植物主 根的发育ꎮ 关键词: 叶酸ꎻＡｔＤＦＢ 基因ꎻ低氮胁迫ꎻ发育ꎻ拟南芥 ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣２３４１.２０１７.０１.０６ ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＰｌａｓｔｉｄｉａｌＦｏｌｙｌｐｏｌｙｇｌｕｔａｍａｔｅＳｙｎｔｈｅｔａｓｅｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ Ｕｎｄｅｒ Ｎ￣ｌｉｍｉｔｅｄ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ １ ２ １∗ １ ＸＵ Ｂｏｓｉ ꎬＭＥＮＧ Ｈｏｎｇｙａｎ ꎬＺＨＡＮＧ Ｃｈｕｎｙｉ ꎬＪＩＡＮＧ Ｌｉｎｇ １.Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＩｎｓｔｉｔｕｔｅꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ １０００８１ꎬＣｈｉｎａꎻ ２.Ｆｕｊｉａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ Ｆｕｊｉａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ Ｂｏｔａｎｙꎬ Ｆｕｊｉａｎ Ｘｉａｍｅｎ ３６１００６ꎬＣｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｆｏｌｙｌｐｏｌｙｇｌｕｔａｍａｔｅ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ (ＦＰＧＳ) ｃａｔａｌｙｚｅｓｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆ ｇｌｕｔａｍａｔｅｒｅｓｉｄｕｅｓｔｏｔｈｅγ￣ｃａｒｂｏｘｙｌ ｏｆ ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｏｓｉｔｉｏｎｓꎬｔｏｆｏｒｍｆｏｌｙｌｐｏｌｙｇｌｕｔａｍａｔｅｓ.ＡｔＤＦＢｉｓｔｈｅＦＰＧＳｔｈａｔｌｏｃａｔｅｄｉｎｐｌａｓｔｉｄｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ.Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ ｔｈｅＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ Ｔ￣ＤＮＡ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｍｕｔａｎｔ (Ａｔｄｆｂ￣３) ｏｆＡｔＤＦＢ ｇｅｎｅｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆＡｔＤＦＢ ｇｅｎｅ ｂｙ ｃｏｍｐａｒｉｎｇ ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｏｆｗｉｌｄｔｙｐｅａｎｄａｔｄｆｂ￣３ｕｎｄｅｒｖａｒｉｏｕｓｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＡｔｄｆｂ￣３ｍｕｔａｎｔｄｉｓｐｌａｙｅｄｓｈｏｒｔｅｒ ｐｒｉｍａｒｙ ｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｆｏｌａｔｅｃｏｎｔｅｎｔꎬｃｏｍｐ