乳酸菌原生质体制备与再生研究-食品科学.PDF

※工艺技术 食品科学 2006, Vol. 27, No. 10 269 乳酸菌原生质体制备与再生研究 曾献春，孟冬丽 (新疆师范大学生命与环境科学学院 ，新疆 乌鲁木齐 830054) 摘 要：从市售酸乳中分离嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌，并对其进行原生质体制备和再生。采用溶菌酶对嗜热 链球菌和保加利亚乳杆菌进行处理，脱去细胞壁以探讨原生质体形成和恢复与菌龄、酶浓度、酶解时间及酶解温 度之间的关系，利用四因素三水平的正交试验选出原生质体形成和恢复较适宜的条件。试验结果显示嗜热链球菌 原生质体制备和恢复的较优条件为，菌龄16h，酶浓度1mg/ml，酶解时间40min，酶解温度42℃，此时原生质 体形成率为98.75% ，再生率为23.8% ；而保加利亚乳杆菌原生质体制备和恢复的较优条件为，菌龄16h，酶浓 度10mg/ml，酶解时间30min，酶解温度36℃，此时原生质体形成率为82.05%，再生率为27.1%。本文研究为这 两种乳酸菌原生质体的制备、再生条件及其基因操作和相关研究提供技术思路和实验条件。 关键词：嗜热链球菌；保加利亚乳杆菌；原生质体制备；再生 StudyonProtoplastFormationandRegeneration inLactobacillus ZENG Xian-chun，MENG Dong-li (School of Life and Environment Science, Xinjiang Normal University, Urumchi 830054, China) Abstract：Object: To make protoplast and regenerate fromStreptococcus thermophillus and Lactobacillusbulgaricus.The factorsareconsidedthattheprotoplast areformedwith thefungusage, theenzymedensity,between theenzymolysistimeand theenzymolysistemperature.To selectthebetterconditionsoftheprotoplastproductionwith fourfactorsthreelevelsofthe orthogonaltestmethod.Results:TheoptimumconditionsoftheStreptococcusthermophilusareasfollows:16hoursofincubation times, concentration of lysozyme 1mg/ml, the hydrolyzing temprature 42℃, treating time 40 minutes. Under the optimum conditions,theratioofformationprotoplastare98.75%,theratioofregenerationare23.8%;andtheLactobacillusbulgaricus areasfollows:16hours,10mg/ml,36℃,30min,82.05%,27.1%.Conclusion:Thetechniqueofthisarticlecouldprovidetheeffective datatogeneticengineerand itsprotoplastfusionofthetwobacteria. Key words：Streptococcus thermophilus；Lactobacillus bulgaricus；potoplast；regeneration 中图分类号：Q781 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2006)10-0269-04 原生质体融合进行基因重