大豆成熟种子胚尖基因枪法转化体系的优化.PDFVIP

第３０卷　第 １期 大 豆 科 学 Ｖｏｌ．３０　Ｎｏ．１ ２０１１年　 ２月 ＳＯＹＢＥＡＮＳＣＩＥＮＣＥ Ｆｅｂ．　　２０１１ 大豆成熟种子胚尖基因枪法转化体系的优化 １ １ １ １ ２ １ １ 叶　美 ，张　敏 ，杨素欣 ，邵　群 ，安海龙 ，曹子谊 ，冯献忠 （１．山东师范大学 生命科学学院，山东省逆境植物重点实验室，山东 济南 ２５００１４；２．山东农业大学 生命科学学院，作物生物学国家重点实验 室，山东 泰安２７１０１８） 摘　要：以山东省主栽大豆品种“荷豆 １２”成熟种子胚尖为材料，探讨了６ＢＡ和潮霉素浓度等因素对基因枪法遗 －１ 传转化的影响，并通过报道基因ＧＵＳ检测了外源基因的表达和整合情况。结果表明：经５ｍｇ·Ｌ ６ＢＡ诱导１６ｈ， －１ “荷豆１２”胚尖的再生丛生芽数目、丛生芽的伸长速率等综合指标最佳；５～１５ｍｇ·Ｌ 的潮霉素多步梯度筛选可以 提高转化筛选效率。基因枪转化后的胚尖组织和转基因植株后代的叶片中均可以观察到 ＧＵＳ基因的表达；通过分 子鉴定证明外源 ＧＵＳ基因插入到转基因后代的基因组中。 关键词：大豆；成熟种子胚尖；基因枪法；遗传转化 中国分类号：Ｓ５６５．１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１０００９８４１（２０１１）０１００２００４ ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＢｉｏｌｉｓｔｉｃｓＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＥｍｂｒｙｏｎｉｃＴｉｐｓｏｆＳｏｙｂｅａｎ［Ｇｌｙ ｃｉｎｅｍａｘ（Ｌ．）Ｍｅｒｒｉｌｌ］ＭａｔｕｒｅＳｅｅｄｓ １ １ １ １ ２ １ １ ＹＥＭｅｉ，ＺＨＡＮＧＭｉｎ，ＹＡＮＧＳｕｘｉｎ，ＳＨＡＯＱｕｎ，ＡＮＨａｉｌｏｎｇ，ＣＡＯＺｉｙｉ，ＦＥＮＧＸｉａｎｚｈｏｎｇ （１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰｌａｎｔＳｔｒｅｓｓＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｈａｎｄｏｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎａｎ２５００１４；２．ＳｔａｔｅＫｅｙ ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｒｏｐＢｉｏｌｏｇｙ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉ’ａｎ２７１０１８，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｏｆｅｍｂｒｙｏｎｉｃｔｉｐｓｏｆｓｏｙｂｅａｎｍａｔｕｒｅｓｅｅｄｓ，ｅｆｆｅｃｔｓｏｆ６ＢＡａｎｄｈｙ ｇｒｏｍｙｃｉｎＢ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｄｕｒｉｎｇｂｉｏｌｉｓｔｉｃｓｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｓｏｙｂｅａｎ ［Ｇｌｙｃｉｎｅｍａｘ （Ｌ．） Ｍｅｒｒｉｌｌｃｖ ‘Ｈｅｄｏｕ１２’］．ＴｈｅＵｉｄＡ（ＧＵＳ）ｇｅｎｅｗａｓｅｍｐｌｏｙｅｄａｓａｒｅｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｔｏｒｅｖｅａｌｔｈｅｆｏｒｅｉｇｎｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ． －１ Ｂｏｔｈｎｕｍｂｅｒａｎｄｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｌｅｎｇｔｈｏｆｍｕｌｔｉｐｌｅｓｈｏｏｔｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｖａｌｕｅｓａｔ５ｍｇ·Ｌ ６ＢＡｆｏｒ１６ｈｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｅｍ ｂｒｙｏｎｉｃｔｉｐｓｏｆｍａｔｕｒｅｓｅｅｄｓ．ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｓｅｌｅｃｔｉｏｎｓｃｈｅｍｅｏｆｔｒａｎｓｆｏｒｍａｎｔｓｗａｓａｇｒａｄｉｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢｆｒ