低氧对血清剥夺后山羊颞下颌关节盘细胞凋亡和自噬的影响.PDFVIP

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2018, 40(8): 1295–1302 DOI: 10.11844/cjcb.2018.08.0061 低氧对血清剥夺后山羊颞下颌关节盘 细胞凋亡和自噬的影响 1 1,2,3* 1 2,3 1 1* 张芳 包广洁 唐玉尧 刘琳 保善英 康宏 1 2 ( 兰州大学口腔医学研究所, 兰州 730000; 西北民族大学口腔医学国家民委重点实验室, 兰州 730030; 3西北民族大学甘肃省口腔疾病研究重点实验室, 兰州 730030) 摘要 该研究体外分离山羊颞下颌关节盘(temporomandibular joint disc, TMJ disc)细胞并 培养至p2代。通过HE(Hematoxylin-Eosin)染色、Hoechst 33258和丹磺酰戊二胺(dansylcadaverine, 报 MDC) 荧光染色观察血清剥夺后细胞的形态学变化以及是否存在自噬和凋亡。随后, 通过流式细 胞术和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)分别检测血清剥夺0 h 、12 h、24 h 、36 h、48 h 和60 h后细胞的凋亡率和自噬水平的变化以及加入自噬抑制剂3-MA(3-methyladenine)后的凋亡变 化。检测给予血清(10% FBS)或血清剥夺(0% FBS)的细胞在常氧(21% O )或低氧(2% O )条件下的 学 2 2 凋亡和自噬的变化。结果发现: 血清剥夺后, 凋亡率随时间的延长逐渐上升, 自噬率先上升后下降; 当血清剥夺诱导的自噬被3-MA抑制后, 细胞的凋亡率明显上升。自噬能够抑制血清剥夺引起的细 胞凋亡, 说明自噬在细胞的存活中有很重要的作用。与常氧培养的细胞相比, 低氧条件下细胞的凋 学 亡率和自噬率均下降。低氧通过降低细胞的过度自噬减少长期血清剥夺引起的细胞凋亡, 比常氧 更有利于细胞的存活。 关键词 颞下颌关节盘; 自噬; 凋亡; 血清剥夺; 低氧 物 Effects of Hypoxia on the Apoptosis and Autophagy of the Goat 生 Temporomandibular Joint Disc Cells after Serum Deprivation 1 1,2,3*, Tang Yuyao1 2,3 1 1* Zhang Fang , Bao Guangjie , Liu Lin , Bao Shanying , Kang Hong 1 胞