里氏木霉几丁质酶表达及其水解产物组成与结构分析-ChinaXiv.PDFVIP

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里氏木霉几丁质酶表达及其水解产物组成与结构分析-ChinaXiv.PDF

里氏木霉几丁质酶表达及其水解产物组 成与结构分析* 焦思明,程 功,张毓宸,冯翠,任立世,李建军,杜昱光**1 (中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室,北京 100190) 摘 要:优化并全合成里氏木霉几丁质酶基因,在毕赤酵母中实现分泌表达。产物几丁质酶的蛋白浓度达 0.17mg/mL pH 5.6 65 0.52U/mL 50 ,最适 为 ,最适温度为 ℃,酶活为 。该酶在 ℃及以下较稳定。利用该 酶水解低脱乙酰度壳聚糖并对产物的组成及结构进行分析。超高效液相色谱 四极杆飞行时间质谱- Ultra-performance liquid chromatography quadrupoletime-of-flight mass spectrometry UPLC-QTOF MS ( , )检 41 2-18 Nuclear 测及分析结果显示,酶解产物中包含至少 种聚合度 ,不同脱乙酰度的壳寡糖组分;核磁共振( magneticresonance NMR N- , )检测及分析结果显示,产物壳寡糖的还原端主要为 乙酰氨基葡萄糖,非还原 N- 端则同时含有 乙酰氨基葡萄糖及氨基葡萄糖。相关结果可为壳寡糖的结构与功能关系研究提供参考。 UPLC-QTOFMS NMR 关键词:里氏木霉;几丁质酶;毕赤酵母;壳寡糖; ; 1 v 6 Expression ofChitinase from TrichodermareeseiandAnalysistheComposition and Structureof 1 1 itsHydrolysates 0 JIAO Si-ming,CHENGGong,ZHANGYu-chen,FENGCui,REN Li-shi,LI Jian-jun,DUYu-guang* 0 (StateKey Laboratory ofBiochemicalEngineering,InstituteofProcessEngineering,ChineseAcademy of . 8 Sciences,Beijing 100190,China) 0 8 1 Abstract:Chitinase encoding gene of Trichoderma reesei was optimized, synthesized and secretorily expressed in 0 Pichiapastoris. The protein concentr

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