叶绿体色素纸层析分离的关键步骤.DOCVIP

叶绿体色素纸层析分离实验的关键步骤 赵子峰，张亚丽，吕辉，郑蔚虹(黑龙江省齐齐哈尔大学生命科学学院生物学系，161006) 生物学教学，2003年(第28卷)第6期 摘要：通过对比85%丙酮、95%乙醇及乙醚三种有机溶剂在提取叶绿体色素的纸层析分离实验中发现，采用乙醚和丙酮混合液提取叶绿体色素的方法，能取得了良好的实验效果。 1前言 影响叶绿体色素层析实验效果主要有以下几个因素： ①取材，材料中叶绿体色素的含量高低和取材的量；②提取溶剂的选择，一个合适的提取剂，不仅要考虑提取效果，而且还要经济节约、操作容易以及污染程度小；③滤纸，选择一种适于观察而且又操作容易的滤纸处理方法；④层析剂，寻找一种有利于色素迅速扩散的层析剂。 在前人做过的大量实验中，有人从取材入手，通过几种材料对比而选出一种较好的材料；有人从滤纸出发，将滤纸条改成灯芯状或用圆形滤纸代替；还有人将层析溶剂加以改进，但实验效果仍不是很理想，原因是胡萝卜素及叶黄素含量低、色带浅。我们认为提取溶剂的选择是最关键的步骤，即如何提高提取液中各色素含量是本实验的关键。一般情况下，各种植物叶片中的叶绿体色素总含量略有不同，但各种成分所占比例几乎是差不多的，叶绿素与类胡萝卜素的分子比例约为3：1，倘若改变提取溶液成分使黄色素含量提高，层析的效果将大大提高。 2材料方法 2.1材料 选择颜色为深绿色的完整健康的菠菜叶片若干，在烘箱内(48