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Mir-128-2小鼠嵌合模型的建立和免疫表型分析 夏菲杨炎炎张进平(通讯作者) (苏州大学牛物医学研究院 江苏苏州215123) 【摘要】microRNA是一类长约24个碱基的非编码RNA,其广泛表达在各种 牛物体内，发挥重要的调节功能，在免疫系统中，亦有报道认为其参与了免疫细 胞的发育、活化等。通过实时定量PCR研究发现：mir-128-2高表达在双阳性、 双阴性T细胞和共同淋巴细胞祖细胞中，而在成熟T细胞和成熟B细胞中表达显 著降低。为进一步探讨mir-128-2在淋巴细胞发育中的作用，我们通过制备过表 达mir-128-2逆转录病毒，并感染小鼠骨髓干细胞制备骨髓嵌合小鼠模型。通过 FACS＞实时定量PCR及Northern?blot鉴定模型成功建立。进一步使用FACS分析 发现mir-128-2 表达后阻碍了 B细胞发育，对T细胞发育无显著影响。进一步 研究发现mir?128-2过表达后并不影响B细胞的凋亡和自我增殖，而可能是阻止 了 CLP向PreProB细胞的发育。通过嵌合小鼠模型建立和表型分析可见mir?128?2 参与了 B细胞发育的调控，表现为阻碍B细胞的发育。 【关键词】microRNA mir-128-2 B细胞发育骨髓嵌合小鼠模型 【中图分类号】R392 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752 (2014) 01-0013-04 The Establishment of Mir-128-2 Bone Marrow Chimeric Mice Model and the An alysis of Immuno phenotype XIA Fei, YANG Yi, ZHANG Jin-ping (Institutes of Biology and Medical Sciences, Soochow University, Suzhou, 215123 Jiangsu Province, China) [Abstract】MiRNAs (miRNAs) are about 24nt non-coding RNAs which are expressed in all organisms and play important roles. In the immune system, they are involved in the development, activation of immunocytes. At present study, we found that mir-128-2 was highly expressed in DN, DP T cells and comm on lymphoid progenitor cells but lowly expressed in the mature T cells and B cells. By infected hemotopoitic stem cells with fresh prepared retrovirus encoding mir-128-2, we successfully established mir-128-2 bone marrow chimeric mice identified by FACS, Northern-blot and real time PCR. Further study displayed that over-expressed mir-128-2 in mice leaded to the block the B cell development but not T cell. Mir-128-2 did not affect the B cell apoptosis and self-proliferation. So mir-128-2 may inhibit the comm on lymphoid proge nitor cells development into PreproB cells. 【Key words］ microRNA mir-128-2 B cell development chimeric mice miRNAs是一类长约24个核昔酸的小分子RNA,广泛存在于动物、植物、病 毒和单个细胞生物体中。miRNAs存在于基因组的非编码区，属于非编码基因。 这些高度保守的RNAs通过特异性地抑制翻译，诱导mRNA降解来调节靶基因的 表达，以此参与细胞增生、分化、凋亡等生物学过程和许多疾病的发生、发展。 大量的研究表明免疫细胞的分化发育和活化依赖于众多的分子调控，如细胞因子、 细胞表面受体、胞内信号传导分子、转录因子等。当这些调节环节出现异常时， 不仅免疫细胞本身的分