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Livin在妊娠滋养细胞肿瘤中表达和意义 ［摘要］目的通过检测凋亡抑制蛋白Livin在妊娠 滋养细胞肿瘤组织中的表达，并讨论与妊娠滋养细胞肿瘤的 临床特征的相关性，为妊娠滋养细胞疾病提供新的诊断及治 疗思路。方法采用免疫组织化学SABC法检测Livin在22 例妊娠滋养细胞组织（14例侵蚀性葡萄胎，8例绒毛膜癌） 中的表达，并以10例正常早孕绒毛组织作对照组。结果 Livin蛋白在侵蚀性葡萄胎中表达率为57. 1%,绒毛膜癌中 表达率为87. 5 %,正常绒毛组织中为10. 0%； Livin蛋白在 妊娠滋养细胞肿瘤中的高表达与正常绒毛组织中的表达差 异具统计学意义（P 妊娠滋养细胞肿瘤是一类严重威 胁女性生殖健康的疾病，目前，主要靠动态观察血B-HCG 的变化及临床症状、体征来诊断GTN及预测起恶变及预后， 但这些临床特点的出 现，具滞后性，甚至延误治疗［2］。因此，寻找新的治 疗药物和有效的预后标记物，以及攻克本疾病仍需要不断进 一步的研究。随着分子生物学技术的发展，研究发现多种因 素参与其发病过程，比如癌基因、抑癌基因，凋亡因子，抑 制凋亡因子等。 凋亡抑制蛋白（Inhibitor of apoptosis proteins, IAP）是一类内源性细胞抑制因子，在很多物种中起抑制凋 亡的作用，其过度表达引起凋亡不足、增殖过度，与肿瘤的 发生密切相关。寻找有效的IAP抑制剂，在肿瘤的治疗中有 着广泛的应用前景[3-4] o Livin （又称KIAP, ML-IAP）是最 新发现的一个IAP家族中的成员，因其在肿瘤组织中的特异 性高表达，已经成为近期研究的热点：5-6] o目前研究表明 多种凋亡相关基因参与妊娠滋养细胞疾病的发生、发展，但 Livin蛋白在妊娠滋养细胞疾病中的表达以及相关性的研究 却鲜有所见。 1资料与方法 1. 1 一般资料 22例妊娠滋养细胞肿瘤患者病例均来自1993年1月? 2006年1月西安交通大学医学院第一附属医院。患者均为女 性，年龄最小21岁，最大53岁，平均32.6岁。手术治疗 的侵蚀性葡萄胎患者的标本14例，手术治疗的绒癌患者的 标本8例。并随机选择正常妊娠（5?12周）行人工流产终 止妊娠者的绒毛组织（正常绒毛细胞组）10例作为对照。全 部病例均经组织病理学证实。 1.2主要试剂 兔抗人Livin多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限 公司。兔SABC检测试剂盒（SP-9001）购自北京中杉金桥生 物技术有限公司。 1.3实验方法 取上述病例蜡块切片，厚4uni,釆用免疫组织化学链霉 亲和素生物素过氧化物酶复合物(SABC)法检测。阴性对照: 以磷酸盐缓冲液(PBS)代替第1抗体；阳性对照：用已知 阳性染色切片作阳性对照。 1.4结果判定 每张切片选择有代表性的区域，并避开切片周边区域， 观察阳性反应采用双盲法，并由有经验的病理科医师观察每 张切片后一起做出判断。以滋养细胞胞浆或胞核出现棕黄色 颗粒为阳性，每张切片显微镜下随机观察10个视野，高倍 镜(X400)下综合染色强度和阳性细胞所占比例进行半定 量测定。染色强度评分标准：染色强度以不着色为0分，浅 黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；阳性细胞数50% 为3分。 染色强度X阳性细胞百分数为每例组织染色的综合记 分。0?1分为阴性(-),2?3分为弱阳性( + ), 4?6分为 阳性(++), 6分为强阳性(+++)。 1. 5统计学方法 采用SPSS13. 0软件包进行统计学分析，用四格表 Fishers确切概率法和Spearman等级相关分析对数据进行 处理，以PI期111期，Livin与GTN患者的年龄、前次妊娠 是否为葡萄胎、治疗前HCG值的髙低、是否有转移及预后无 明显相关性(P0.05)。 表2 Livin在GTN中的表达与临床特征的关系 22 7 15 68. 2 0. 423项目例数Livina阳性率（ 22 7 15 68. 2 0. 423 240 8 3 5 62. 5 105 4 1 3 分期 0. .045 I期 9 2 7 77. 7 II期 5 0 5 100.0 III期 8 5 3 37. 5 预后 1. ,000 低危 1( 5 5 11 68.8 高危 6 2 4 66. 7 年龄（岁） 75.0 近十年来，妊娠滋养细胞疾病的分子生物学研究取得很 大的发展，众多学者已经发现多种肿瘤标志物，与GTN的发病发展有关，包括：白介素、肿瘤坏死因子、血管内皮生长 因子、增殖性标志物中的PCNA、Ki-67、金属蛋白酶及其抑 制物以及癌基因、抑癌基因等［7］。 图1 Livin在正常绒毛中的阳性表达（X400） 图2 Livin在侵葡中的阳性表达（X400） 图3 Livin在绒癌中的阳性表达（X40