高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段课件新人教版.pptxVIP

目标导航预习导引目标导航预习导引一二三四一、PCR原理1.概念:是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。2.DNA复制需要的条件解旋酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸、DNA聚合酶和引物。3.DNA的热变性:在 80~100 ℃的温度范围内,DNA的双螺旋结构将解体,双链分开,这个过程称为变性;当温度缓慢降低后,两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链,这个过程称为复性。?4.PCR反应的条件一定的缓冲溶液;DNA模板;分别与两条模板链相结合的两种引物;四种脱氧核苷酸;耐热的DNA聚合酶,一般用Taq DNA聚合酶;控制温度。?目标导航预习导引一二三四二、PCR反应过程1.变性:当温度上升到 90 ℃以上时,双链DNA解聚为单链,一般实验温度为95 ℃。?2.复性:温度下降到50 ℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,一般实验温度为 55 ℃。?3.延伸:温度上升到 72 ℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。?PCR的变性过程实质上也是解旋,PCR的解旋和细胞内的DNA解旋有何不同?提示：PCR在高温条件下(90~100 ℃)解旋,而细胞内的DNA在解旋酶的作用下解旋。目标导航预习导引一二三四三、实验操作1.PCR仪:能够自动调控温度的仪器,实现D